鞘内注射布托啡诺对神经病理痛模型(SNI)大鼠痛阈及脊髓背角NMDAR表达的影响

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目的:本研究拟采用免疫组织化学方法,观察SNI(spared nerve injury model,SNI)模型大鼠脊髓背角神经元NMDAR的表达,以及鞘内注射布托啡诺对SNI模型大鼠痛阈及脊髓背角NMDAR表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠25只,体重200-270g,随机分为5组:对照组(C1组,n=5),假手术组(C2组,n=5)、生理盐水组(NS组,n=5)、布托啡诺12μg组(B1组,n=5)、布托啡诺24μg组(B2组,n=5)。C1组不做任何处理,其它4组均根据改良Yaksh法进行鞘内置管。置管5天后,C2组在大鼠的左腿后外侧依次分开皮肤和肌肉,暴露坐骨神经及其三个分支,然后依次逐层缝合肌肉和皮肤;其它置管的3组则建立神经病理性疼痛模型(SNI),制模2天后,C2组和NS组用25μl微量注射器鞘内注射20μl生理盐水,B1、B2组则分别用微量注射器鞘内注射10μl布托啡诺12、24μg,然后用10μl生理盐水冲管(共20μl)。在30min后,C2组、NS组、B1组和B2组均进行疼痛行为学观察。5组均在注药后2h处死大鼠,用免疫组化法观察大鼠腰5节段水平脊髓背角NMDAR的表达。结果:(1)C1组和C2组在各时点均无机械性异常疼痛出现,热刺激后爪退缩潜伏时间也均无统计学意义(P>0.05);(2)NS组,B1组和B2组在SNI手术后第1天和第2天出现明显的痛觉过敏(机械性异常疼痛痛阈降低),与对照组比较有统计学意义(P<0.01),但对热刺激的后爪退缩潜伏时间与对照组比较无统计学意义(P>0.05);(3)B2组在注药后30min使痛阈明显提高,与注药前比较有统计学意义(P<0.01),并且能使热刺激后爪退缩潜伏时间明显延长,与其它组别比较有统计学意义(P<0.05);(4)NS组大鼠脊髓背角NMDAR免疫阳性细胞数量与对照组比较明显增加,B1组和B2组的阳性细胞数量与NS组比较阳性细胞数量减少,并且两者之间也有统计学差异(P<0.05);(5)NS组的脊髓背角NMDAR免疫阳性细胞数密度值与对照组相比显著增高(P<0.05),B1组和B2组与NS组相比NMDAR1阳性细胞的数密度大小及分布减少,并且两者之间也有统计学差异(P<0.05)。NS组,B1组和B2组的阳性细胞光密度值较C1组和C2组增高(P<0.05)。结论:(1)SN工模型可引起大鼠损伤侧肢体机械性痛觉过敏,但对热刺激不敏感;(2)鞘内注射24μg布托啡诺可减轻SNI模型大鼠痛觉过敏,且呈剂量依赖性;(3)SN工模型引起大鼠脊髓背角神经元NMDAR表达上调;鞘内注射布托啡诺可降低SNI大鼠脊髓背角神经元NMDAR表达上调。
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