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随着社会经济发展,物质生活水平提高,人们的饮食结构发生了重大变化。高脂肪等高热量的摄入增加,体力活动减少使得高脂血症的发病率已日趋增高。高脂血症是指血浆中胆固醇(TC)和/或三酰甘油(TG)水平升高,实际上是血浆中某一类或某几类脂蛋白代谢紊乱,包括高TG血症、高TC血症以及低高密度脂蛋白血症。高脂血症是冠状动脉粥样硬化的主要危险因素之一,而冠心病(Coronary heart disease)是严重危害人体健康、影响生活质量的常见病、多发病。近年来中医药在调节血脂,防治冠心病方面取得了较大的发展,红景天提取物就是其中的一种。红景天提取物是由高原中药圣地红景天提取而成的,具有益气活血、通脉止痛的作用。大量临床和动物实验证明红景天在降低血脂方面作用显著,并且通过降低血脂的作用发挥其改善冠心病的症状。临床上多用于血瘀所致的冠心病、心绞痛、心肌缺血,不但疗效肯定且未发现任何副作用,但其改善血脂的作用机制尚需进一步研究。1990年,Issemann等发现了一种新的甾体激素类受体,称作过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR),它能被脂肪酸和一些外源性的过氧化物酶体增殖剂激活,参与调控脂类代谢和免疫反应等生理过程。PPARs根据其结构及功能可分为PPAR-α、PPAR-β、PPAR-γ三种亚型。其中PPAR-α高水平表达在肝细胞、心肌细胞、肠细胞及肾近曲小管细胞; PPAR-γ则主要表达在脂肪细胞。PPAR是核受体超家族成员之一,可以促进脂肪细胞分化,在脂类代谢中起着重要的作用,可能是体内脂质平衡的生理传感器,在维持体内脂质代谢的动态平衡中起到枢纽作用。本研究通过以高脂饮食喂养正常成年Wistar大鼠,诱导出高脂血症模型大鼠。观察红景天提取物对高脂血症大鼠肝脏PPAR-α、PPAR-γ表达的影响,从而进一步深入探讨红景天对脂代谢影响的作用机理。方法:清洁级健康成年雄性Wistar大鼠30只(购于河北医科大学实验动物中心),体重250~300g,适应性喂养一周后随机分为2组,对照组(Normal Control, NC组)10只,高脂组(High-fat Diet, HF组)20只。对照组给基础饲料,热量组成为碳水化合物热卡占65.5%,脂肪热卡占10.3%,蛋白质热卡占24.2%;高脂组给高脂饲料,热量组成为碳水化合物热卡占20.1%;脂肪热卡占59.8%;蛋白质热卡占20.1%。所有饲料均由河北医科大学实验动物中心配制。喂养4周后再将高脂组随机分为高脂对照组( Hyperlipidemic,HL组)和高脂+红景天干预组(Hyperlipidemic+ Integripetal rhodiola herb,HLR组),每组10只。高脂+红景天干预组给予红景天提取物1g·kg-1·d-1 [16]灌胃。高脂对照组给予等量的生理盐水灌胃,饲养条件不变。于实验4周和8周时测量大鼠体重、血压,并经心脏采血测血清甘油三酯(TG),血清总胆固醇(TC),用铜显色法测定血中游离脂肪酸(FFA)的含量。于实验第8周将大鼠处死后迅速取肝脏组织冻存,用于荧光定量PT-PCR法测定肝脏PPAR-αmRNA、PPAR-γmRNA的表达,并进行BP、FFA、TC、TG和肝脏PPAR-αmRNA、PPAR-γmRNA的表达的相关性分析。结果:1.第4周后HF组体重(293.66±27.57)g与NC组(265.33±31.15)g相比差异略有升高,但无统计学意义(P>0.05)。第8周末HL组体重(323.66±29.09)g和NC组(311.33±26.31)g相比升高,差异无统计学意义(P>0.05);HLR组大鼠体重(317.71±22.38)g和HL体重相比下降,差异无统计学意义(P>0.05);HLR组体重和NC组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。2.第4周后HF组大鼠血压(106.25±14.82)mmHg与NC组(86±15.05)mmHg相比升高,差异有统计学意义(P<0.01)。第8周末HL组血压(124.3±7.3)mmHg与NC组(93.6±11.4)mmHg血压相比升高,差异有统计学意义(P<0.01);HLR组血压(94.3±7.7)mmHg与HL组血压相比下降,差异有统计学意义(P<0.01);HLR组血压与NC组血压相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3.血生化指标:第4周后HF组TC(0.95±0.07)mmol/L与NC组(0.76±0.12)mmol/L相比升高,差异有统计学意义(P<0.01);HF组TG(0.75±0.09)mmol/L与NC组(0.60±0.10)mmol/L相比升高,差异有统计学意义(P<0.01)。第8周末HL组TC(1.01±0.01)mmol/L与NC组(0.81±0.09)mmol/L相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);HL组TG(0.74±0.04)mmol/L与NC组(0.59±0.09)mmol/L相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);HLR组TC(0.78±0.14)mmol/L和HL组(1.01±0.01)mmol/L相比显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);HLR组TG(0.58±0.11)mmol/L和HL组(0.74±0.04)mmol/L相比显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);HLR组TC和NC组相比下降,差异无统计学意义(P>0.05);HLR组TG和NC组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。4.不同饮食喂养4周后HF组FFA(1145.42±261.84)umol/L与NC组(653.33±153.04)umol/L相比升高,差异有统计学意义(P<0.05)。喂养8周后HL组FFA(1252.4±432.6)umol/L与NC组(676.3±138.5)umol/L相比升高,有统计学意义(P<0.05)。HLR组FFA(780.3±164.9)umol/L与HL组(1252.4±432.6)umol/L下降,差异有统计学意义(P<0.05);HLR组FFA与NC组相比,差异无统计学意义(P>0.05); 5.各组喂养8周后肝脏PPAR-αmRNA、PPAR-γmRNA的表达:第8周后肝脏PPAR-αmRNA的表达:HL组肝脏PPAR-αmRNA的表达(3.8590±0.8324)与NC组(7.7322±1.9394)相比显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。HLR组肝脏PPAR-αmRNA的表达(19.0780±12.6199)与HL组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);HLR组肝脏PPAR-αmRNA的表达与NC组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);第8周后肝脏PPAR-γmRNA的表达: HL组肝脏PPAR-γmRNA的表达(0.3916±0.1248)与NC组(0.3674±0.1209)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HLR组肝脏PPAR-γmRNA的表达(4.450±1.6464)与HL组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);HLR组肝脏PPAR-γmRNA的表达与NC组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。6.相关分析结果,选择肝脏PPAR-αmRNA、PPAR-γmRNA的表达分别与BP和血清FFA、TC、TG进行相关性分析,结果显示肝脏PPAR-αmRNA的表达与BP和血清TC、TG、FFA有明显负相关(γ值分别为-0.9464、-0.8717、-0.9178、-0.8282)p值分别为(0.0042、0.0236、0.0098、0.0417);肝脏PPAR-γmRNA的表达与BP和血清TG、TC、FFA无明显相关性。结论:1.经高脂饮食喂养成年Wistar大鼠出现了高胆固醇、高甘油三脂血症,血压升高,成功地诱发出高脂血症大鼠模型。2.第8周后高脂饮食喂养的大鼠TC、TG、FFA和BP均显著升高。经红景天提取物药物干预的大鼠TC、TG、FFA和BP均显著下降。3.第8周后高脂饮食喂养的大鼠肝脏PPAR-αmRNA表达显著下降、PPAR-γmRNA表达无显著改变。经红景天提取物药物干预的大鼠肝脏PPAR-αmRNA表达显著升高,PPAR-γmRNA表达也显著升高。4.经相关分析表明,肝脏PPAR-αmRNA的表达与血清FFA、血清胆固醇、血甘油三酯、血压呈显著负相关;肝脏PPAR-γmRNA的表达与血清FFA、血清胆固醇、血甘油三酯、血压无明显相关,提示肝脏PPAR-αmRNA的表达与血清FFA、血清胆固醇、血甘油三酯密切相关。