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亚铁血红素不仅具有抗贫血作用,而且具有抗氧化清除自由基的功能,本研究主要对亚铁血红素的制备、保护、纯化及其功能性进行研究。采用亚硫酸钠还原和吡啶-氢氧化钠显色法绘制亚铁血红素的标准曲线。曲线精密度偏差为0.449%,重现性0.4813%,显色稳定,回收率置于置信区间;高铁血红素的标准曲线R~2为0.9999,回收率置于置信区间;高效液相色谱法绘制标准曲线,精密度RSD为0.70%,重现性2.02%,回收率置于置信区间。表明标准曲线准确度很高,方法可行。复合酶解牛血红蛋白制取亚铁血红素。对两种酶底物浓度、酶浓度、pH值和酶解时间进行单因素、正交和回归实验。且采用单一抗氧化剂、还原剂及抗氧化剂/还原剂组合保护亚铁血红素中的二价铁。结果表明:碱性蛋白酶底物浓度7%、加酶量1%、pH值8、酶解2h,风味酶pH值为6.5、加酶量2%、酶解2h,可得到最好水解效果,此时,亚铁血红素得率11.18mg/ml;保护剂L-抗坏血酸棕榈酸酯(0.03%)/亚硫酸钠(0.03%)的亚铁保护性能最强,亚铁血红素得率可达12.60mg/ml,与无保护剂添加比提高了11.27%;酶解产物露置168h后亚铁血红素得率可达到7.44 mg/ml,与未添加比提高了6.85%。采用酸碱法和盐析法进行亚铁血红素的纯化,酸碱法纯化单因素为碱浓、料液比和pH值。进行了RSM模型,获得最优条件为碱浓0.5%、料液比1:15、pH为6,血红素铁纯度9.63%,得率3.48mg/ml;盐析法纯化单因素为碱浓、料液比、钙盐添加量。获得最优纯化条件为:碱浓1%、料液比1:10、钙盐添加量1g,得率为2.71mg/mL,纯度为60.91%。实验发现,盐析法优于酸碱纯化法。对制得的亚铁血红素进行了抗氧化实验。体外抗氧化实验主要进行了DPPH自由基、过氧化氢自由基、还原力能力和总抗氧化能力测定。亚铁血红素的DPPH自由基清除率随浓度增加而上升,为63.24%-65.75%;过氧化氢自由基清除率随浓度的增加而增强,清除率为抗坏血酸的15%-85%;还原力与浓度呈正相关,为抗坏血酸的12%-69%;总抗氧化能力随浓度增加而增高,约为抗坏血酸的5%-11%。体内抗氧化性研究中,亚铁血红素治疗组可明显提高CAT含量、SOD活力、GSH水平和降低MDA含量,而且中剂量组T-AOC的均值最高,表明中剂量组亚铁血红素组具有最高的抗氧化活性。对制得的亚铁血红素进行了铁吸收效果实验。与对照组相比,大鼠对亚铁血红素的生物利用率很高。分别进行了体重、脏器系数、血红蛋白浓度、红细胞数量、红细胞压积、平均血红蛋白浓度、白细胞数量、中性粒细胞数量、中性粒细胞比率和血清铁指标的影响研究。实验发现,中剂量亚铁血红素的供给组的各项指标显著高于对照组,表明中剂量更适宜作为大鼠的补充剂量。