【摘 要】
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纳米金粒子具有良好的稳定性、表面效应、光学效应以及特殊的生物亲和性,可与生物活性分子结合形成探针,用于生物体系检测。由于纳米金随其直径大小不同可以呈现红色至蓝色的不
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纳米金粒子具有良好的稳定性、表面效应、光学效应以及特殊的生物亲和性,可与生物活性分子结合形成探针,用于生物体系检测。由于纳米金随其直径大小不同可以呈现红色至蓝色的不同颜色变化,这种信号稳定,肉眼可见,大大降低了对信号检测的要求,可以简化整个测定过程,这种优越性使纳米金标记法作为一种生物标记手段,已广泛地应用于DNA测序和蛋白免疫检测中。 本研究采用树状体(dendrimer)PPIHA(聚苯丙烯亚胺,十六烷基氨)在加热的条件下还原HAuCl4,反应过程中PPIHA同时作为保护剂和还原剂,制备出表面修饰了氨基基团的纳米金,可以直接应用于生物标记,且避免了在修饰过程中可能造成的团聚。研究了制备过程中比率R、温度T、浓度C、时间t、搅拌速度v、pH值等参数的影响规律,优化了制备纳米金的反应条件,制备了分散性、均匀性良好的稳定纳米金。另外还采用NaBH4和PPIHA共同制备纳米金,并通过两种方法的比较,进一步讨论了PPIHA在制备反应中的作用。用紫外可见分光光度计、透射电子显微镜、纳米粒度分析仪作为检测手段,对制得的纳米金进行了表征。三种表征方法基本得到了一致的规律。 研究中已初步将制得的纳米金用于标记DNA和牛血清白蛋白,结果表明,采用PPIHA制得的纳米金由于表面修饰了多氨基基团,可以与3′或5′端修饰了磷酸基团的单链寡核苷酸连接,当分别修饰了靶序列寡核苷酸和其互补序列寡核苷酸的纳米金溶胶混合后,反应体系颜色由红色变为紫色。在BSA浓度低于1mg/mL的范围内,纳米金-BSA复合物的吸光度随BSA浓度增大呈近似线性的增加,因此该方法具有对蛋白做简单定量分析的可能性。
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