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目的：体外观察国人耐药的骨肉瘤细胞在常用的化疗药物作用下有无G2M期阻滞，观察咖啡因能否缩短或取消耐药骨肉瘤细胞G2M期阻滞，并逆转其细胞耐药。 研究方法：用国人的骨肉瘤细胞株OS-732，通过小剂量阿霉素诱导的方法，来建立多药耐药细胞模型R-OS-732。MTT比色法测定不同浓度梯度的阿霉素、氨甲喋呤对OS-732及R-OS-732两种细胞抑制率，用SPSS12.0统计软件求直线回归方程，并以此推算出两种药物对两种细胞的半量抑制浓度（IC50）值，通过比较同一药物对两种细胞的IC50值，来观察所诱导的细胞是否具有耐药性。采用析因实验设计，将耐药细胞R-OS-732分成6个组，分别为阴性对照组，阿霉素单独应用组，氨甲喋呤单独应用组，咖啡因单独应用组，咖啡因与阿霉素联合应用组，咖啡因与氨甲喋昤联合应用组。将细胞置于37℃ 5％CO2孵箱内培养，于48小时取出各组部分细胞，流式细胞仪（FCM）测定每组处于G2M期细胞比例，于72小时取出各组另外的细胞，MTT法测定各组细胞抑制率，用方差分析对各组数据进行比较，来观察处于G2M期的R-OS-732细胞比例在化疗药物作用后及联合应用咖啡因后的变化，观察咖啡因与两种化疗药物之间是否具有协同作用，联合应用能否提高肿瘤抑制率，从而逆转R-OS-732细胞耐药性 结果：阿霉素对R-OS-732细胞的IC50值是对OS-732细胞的4.58倍，氨甲喋呤对R-OS-732细胞的IC50值是对OS-732细胞的3.75倍，说明R-OS-732细胞具有多药耐药性。单独应用咖啡因组耐药骨肉瘤细胞R-OS-732处于G2M期的细胞比例与与阴性对照组比较没有明显变化，单独应用阿霉素或氨甲喋呤，耐药骨肉瘤细胞R-OS-732处于G2M期的比例增加，即出现了G2M期阻滞，联合应用咖啡因后处于G2M期的细胞比例与单独应用化疗药物组组比较明显减少，G2M期阻滞没有出现，说明联合应用咖啡因可以取消或缩中文摘要短GZM期阻滞。同时，联合应用咖啡因后，阿霉素氨甲喋吟肿瘤抑制率都有明显的提高，单独应用smmol/l咖啡因对骨肉瘤细胞没有明显的抑制作用。统计结果显示，咖啡因与阿霉素及氨甲喋吟之间有协同作用。 结论l阿霉素氨甲喋吟作用于耐药的骨肉瘤细胞后，细胞出现GZM期阻滞，GZM期阻滞可能是多药耐药骨肉瘤细胞耐药机制之一。2咖啡因可以缩短或取消耐药骨肉瘤细胞的GZM期阻滞从而缩短DNA受损细胞修复时间。3安全浓度的咖啡因与阿霉素氨甲喋吟等药物之间具有协同作用，可以提高化疗药物肿瘤抑制率，从而逆转骨肉瘤细胞多药耐药。