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【研究背景】冠状动脉硬化性心脏病,简称冠心病,是一个慢性、多因素的炎症性疾病,它可以导致急性冠脉综合征和突然的心脏性猝死。冠心病引起的心肌梗死等卒中性疾病目前依然是全球人口死亡和残疾的主要原因。其发病率随患者年龄增长而升高,且初始发病患者呈年轻化趋势。尽管目前心血管介入治疗技术发展迅速,但仍有相当大比例的冠心病患者由于临床症状不典型,早期未能准确诊断,并且在心梗发作时没有得到有效的救治。急性冠脉综合征等冠心病严重阶段将会对心肌细胞造成严重损害,最终导致心肌细胞肥大、纤维化、坏死或凋亡。研究发现,冠心病跟家族史有关,同时有很多明确的危险因素,如糖尿病、高血压、高血脂、吸烟等,这就意味着冠心病的发生发展与遗传基础密切相关。但由于冠心病的发生发展影响因素众多,是一个具有复杂遗传基础背景的多基因遗传性疾病,并且由于研究技术上的限制,对冠心病遗传基础的研究进展缓慢。随着人类基因组计划的实施,以及全基因组关联分析（GWAS）方法的开展,人类对复杂性疾病的遗传研究有了新的方向。GWAS是以单核苷酸多态性（SNP）为分子遗传标记,通过大量样本的病例对照关联分析,客观的发现疾病新的易感基因。而SNP是人类遗传变异中最常见的形式。GWAS研究发现人染色体9p21基因区域的基因变异是心血管疾病的危险因素之一。染色体9p21是人类冠心病和其他形式的心脑血管疾病如中风、外周动脉疾病和动脉瘤等研究中复制最成功的遗传因子,虽然近年来研究内容有很大进展,但其在动脉粥样硬化发生发展中的作用机制尚不完全清楚。9p21区段包含了许多与冠心病可能相关的SNP位点,但这些SNP位点几乎都位于非编码区域,而与这段冠心病相关区域最近的蛋白编码基因,是与其相隔几千碱基对（kb）的INK4b-ARF-INK4a基因座。INK4b-ARF-INK4a基因座长约35kb,内含3种已知的编码基因:CDKN2B（即INK4b）、CDKN2A（包括INK4a和ARF）,它们编码2个依赖细胞周期蛋白的激酶抑制剂p15INK4b、p16INK4a以及另一蛋白质p14ARF,这3种蛋白均参与细胞周期的调控。而染色体9p21 CAD风险SNP位点核心区段与INK4位点反义链上的lncRNA INK4基因座反义链非编码RNA（antisense non-coding RNA in the INK4 locus,ANRIL）的1319外显子区段相重叠。研究发现ANRIL在受动脉粥样硬化影响的多种组织和细胞类型中表达,且ANRIL包含多种线性和环状异构体。然而,关于这些转录产物如何参与到动脉硬化的发病机制中的具体原因未明。在此,我们假设9p21基因座的单核苷酸多态性（SNP）会影响到相关区域转录本（如ANRIL、CDKN2A/2B）的表达,从而参与动脉粥样硬化形成。【研究目的】1.研究冠心病患者外周血中3个SNP（rs1333049,rs564398,rs2811712）、长链非编码RNA ANRIL、CDKN2A、CDKN2B的表达水平以及相互关系。2.探索长链非编码RNA ANRIL在冠心病诊断中的临床意义。【研究方法】1.筛选冠心病患者和正常对照组,记录详细病史、体格检查,筛查肝肾功能、血脂、血糖、心电图等临床资料;2.对入选的研究对象取静脉血,提取DNA,选取9p21区域3个感兴趣的SNP（rs1333049,rs564398,rs2811712）进行基因型分型,应用统计学方法分析SNP与冠心病的关联性;3.RT-PCR法测定外周血中9p21基因区域相关转录产物lncRNA-ANRIL、CDKN2A、CDKN2B的相对表达量,分析各变量之间的相关性;4.应用ROC曲线分析ANRIL的表达在冠心病诊断中作用。【研究结果】rs564398与rs2811712等位基因频率在冠心病组和对照组中的比较并无统计学意义（p>0.05）;冠心病组单核苷酸rs1333049等位基因G显著低于对照组（p<0.05）;冠心病组ANRIL（外显子1-2）与ANRIL（外显子17-18）的相对表达量均明显小于对照组（均p<0.01）;ROC曲线示:ANRIL（外显子1-2）、ANRIL（外显子17-18）在诊断冠心病方面均具有统计学意义（均p<0.01）;冠心病组rs1333049等位基因G与ANRIL（外显子1-2）、ANRIL（外显子17-18）的表达均呈正相关（r=0.3402/0.3124,均p<0.05）;lncRNA-ANRIL（外显子1-2）与CDKN2A、CDKN2B表达均呈正相关（均p<0.05）,lncRNA-ANRIL（外显子17-18）与CDKN2A的表达呈正相关（p<0.0001）。【结论】ANRIL可能通过调控CDKN2A/B的表达影响冠心病的发生发展,ANRIL的表达可能受染色体9p21区域单核苷酸rs1333049表达的影响,外周血ANRIL的表达可以作为早期诊断冠心病的特异性指标。