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研究背景顺铂(DDP)等多种化疗中使用的药物常伴随腹泻、呕吐等胃肠副反应,严重限制其在临床的使用。多项研究初步证明,顺铂能够造成肠道多种屏障的损伤及紊乱。目前研究显示,肠道屏障为肠道菌群提供微环境基础,肠道菌群中的生理性细菌又构成肠道的生物屏障。肠屏障与肠道微生物组之间存在重重联系,我们前期实验发现顺铂能够导致肠道中微生物组的失衡。如果能够建立顺铂造成的肠道屏障损伤及肠道菌群失衡之间的联系,将为临床改善顺铂导致的肠道副作用提供理论依据。浒苔是我国东部沿海居民经常食用的绿藻,我们前期的实验发现浒苔及浒苔多糖能够有效调节便秘小鼠肠道菌群多样性,进而改善便秘。基于以上背景及前期实验基础,我们对小鼠进行不同时间的顺铂处理,探究顺铂导致的肠道屏障损伤及肠道菌群的紊乱之间的联系。其次用浒苔多糖对小鼠进行预处理,探究浒苔多糖能否降低顺铂对肠道菌群及肠道屏障的破坏。目的首先明确顺铂造成小鼠肠道损伤及肠道菌群紊乱的先后关系,其次对小鼠进行浒苔多糖干预,探究浒苔多糖对顺铂造成的肠道损伤是否有干预作用。方法1.采用水提法提取浒苔多糖,利用多糖在60%-80%酒精中沉淀的性质将多糖浓缩。2.动物实验为BALb/c小鼠,雌性,将其随机分为三组,对照组(No)、顺铂组(DDP)、顺铂及浒苔多糖组(DDP+PEP)。首先对DDP+PEP组进行浒苔多糖干预,1周后,用配制好的顺铂对DDP和DDP+PEP两组小鼠进行单次腹腔注射,剂量为14mg/kg。一部分DDP组小鼠在0、12、36及72h各时间点分别处死3只,每个时间点均收集在72h时间点处死的小鼠的粪便,其他小鼠在72h后处死,取血、小肠、小肠肠壁定植菌及粪便进行研究。3.选用Td T介导的d UTP末端标记法对各组小鼠的肠道上皮细胞凋亡进行检测;对16s DNA片段测序,研究各组小鼠肠道中各种细菌比例的差异;采用H&E染色技术确定肠道出现的病例损伤;采用免疫组化技术对小鼠小肠各个屏障的多项指标进行检测。最后,将PCR-DGGE及16s DNA测序技术结合,对小肠肠壁定植菌(生物屏障)进行检测。结果1.注射顺铂12h后检测到肠道中细菌比例发生变化;36h后小肠病理学出现损伤。2.顺铂导致肠内菌群中变形菌门含量大幅增长;肠道机械屏障中上皮细胞大量凋亡;化学屏障中表达黏液蛋白的细胞数明显减少;免疫屏障中Ig A阳性细胞数减少;生物屏障中志贺菌属丰富度增加。3.在浒苔多糖的干预下,肠道菌群紊乱情况明显减轻,肠道各个屏障的损伤大幅度降低。小肠定植菌中乳酸杆菌明显增加,致病菌减少。结论1、顺铂能够造成肠道菌群的失衡,造成小肠四种屏障的破坏;肠道菌群失衡发生的时间早于肠道屏障的损伤。2.浒苔多糖的干预能够降低顺铂造成的肠道菌群紊乱以及肠道屏障的损伤。本实验证明浒苔多糖对顺铂造成的多种肠道损伤的确具有干预作用,这能够为临床提供理论依据,辅助提高癌症患者的生活质量。