为改善戊肝疫苗的稳定性,需向疫苗中添加可以抑制佐剂聚合的磷酸盐和多羟基化合物。本文以热处理试验疫苗免疫动物的血清抗体水平作为评价疫苗稳定性的关键指标,从疫苗抗原吸附量及免疫效力两方面对戊肝疫苗的稳定性进行探索。探索氢氧化铝佐剂与戊肝抗原的吸附条件,最终确定采用NaH2PO4处理氢氧化铝佐剂,二者以1：1(v／v)混合25℃静置1d完成吸附过程。在此基础上,改变试验疫苗中的离子强度(NaCl)或疏水物质(乙二烯乙二醇)浓度,探索抗原在佐剂表面的吸附量变化。由吸附量随NaCl或乙二烯乙二醇浓度增大而减小的变化规律证实佐剂吸附戊肝抗原受静电引力和疏水作用的影响。以吸附力对抗原吸附量的影响为指导,在佐剂中添加不同浓度的磷酸盐和一定量的多羟基化合物,以之配制试验疫苗。用羊淋巴液解离试验疫苗,抗原吸附量随磷酸盐浓度增大和多羟基化合物的添加而减小,表明这两种物质可改变佐剂对抗原的吸附强度,进而可能改善试验疫苗的免疫效力。动物实验结果表明佐剂批次导致疫苗免疫效力间存在差异。为改善疫苗老化稳定性,减小由佐剂批次造成的疫苗质量差别,设计七因素三水平正交试验L18(37)。结果显示磷酸根浓度对疫苗免疫血清抗体水平有明显影响,且磷酸盐水平越高,血清抗体水平也越高。但正交试验所选的磷酸盐水平偏低,继续增大疫苗中磷酸根浓度以便观察免疫血清抗体滴度变化。磷酸根浓度达到4 mmol/L后,抗体水平达到平稳状态。当磷酸根浓度为6mmol/L时,考察磷酸盐种类和疫苗pH值对免疫血清抗体水平的影响。含NaH2PO4比含PB的疫苗更有利于抗体水平提高,且含NaH2PO4的疫苗免疫效力对pH值变化不明显。最终获得热加速稳定且可能不受佐剂批次影响的疫苗组方。