神经营养素是一个由多个相关蛋白组成的家族,最初是作为感觉和交感神经元的存活因子被鉴定出来,在周围神经系统和中枢神经系统中可以调控神经元的存活、发育和功能等诸多方面。在哺乳动物中有4类神经营养素：神经生长因子(NGF)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)和神经营养素-4/5(NT4/5)。神经营养素主要通过两种类型的膜受体传递信号到胞内,它们分别是原肌球蛋白相关激酶(tropomyosin-related kinase,Trk)酪氨酸激酶受体以及p75神经营养素受体(p75NTR)。每种神经营养素,可以激活受体酪氨酸激酶原肌球蛋白相关激酶家族中的三个成员(TrkA、TrkB、TrkC)中的一个或多个。此外,每种神经营养素都可激活p75神经营养素受体。通过Trk受体,神经营养素激活Ras、磷脂酰肌醇3激酶、磷脂酶C-γ1以及这些蛋白调控的信号通路,如MAP激酶。真核翻译起始因子eIF4F (eukaryotic translation initiation factor4F)是蛋白复合物,负责将核糖体募集到mRNA上。该复合物由eIF4A (RNA依赖的ATPase和RNA解旋酶)、eIF4E(帽结合蛋白)和eIF4G (脚手架蛋白)三个亚单位组成。eIF4A是ATP依赖的RNA解旋酶,负责打开mRNA5’端非编码顺序的次级结构以便核糖体的募集。eIF4A家族成员有3个,eIF4A1、eIF4A2和eIF4A3。eIF4A是一些分子如Pdcd4、Patemine A、多羟基瑙醇、15d-PGJ2、BC1RNA等抑制翻译起始的靶点。在我们的前期研究工作中证实了p75NTR和TrkA均能与RanBPM相互作用,三者形成一个复合物而TrkA抗体对真核细胞裂解液的免疫沉淀复合物的电泳分离和质谱分析得到了TrkA胞内区(intracellular domain of TrkA,TrkAICD)的新的相互作用蛋白—eIF4A1,本论文将在此基础上深入研究TrkA与eIF4A1的相互作用的分子机制及功能。在本研究中,我们发现1.酵母双杂交、GST pull-down、免疫共沉淀实验证实TrkAICD能与eIF4A1相互作用。2. eIF4A1主要通过N端与TrkAICD相互作用；而TrkAICD通过酪氨酸激酶结构域(TK)与eIF4A1相互作用。3. GST pull-down、免疫共沉淀实验证实TrkA能与eIF4A1相互作用。4.体内翻译实验证实TrkA能促进5’端带有发夹结构的mRNA的翻译。5.体内泛素化实验证实eIF4A1能降低TrkA受体的泛素化。IFN-λ是最近新发现的一种IFNs,被干扰素和细胞因子研究国际学会命名委员会命名为Ⅲ型IFNs。IFN-λ家族包括三个成员：IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ3(也分别称为IL-29、IL-28A、IL-28B)。IFN-λ通过其受体IFN-λR发挥作用。IFN-λR属于Ⅱ型细胞因子受体家族,由两个亚基构成：CRF2-12(也称为IFN-λR1)和CRF2-4。IFN-λH1是IFN-λR特有的亚基。CRF2-4同时也是L-10、IL-22、IL-26受体的组成部分。IFN-λR的两个亚基在人体的多种细胞系和组织中都有表达,通过JAK-STAT通路传导信号。IFN-λ与受体结合后,具有抗病毒和其它的生物学活性,其信号传导机制与Ⅰ型IFNs目似。肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necorsis factor receptor associated factors,TRAFs)是细胞内的接头蛋白,能够将TNFR超家族成员的胞内区的信号传递到细胞内。目前,哺乳动物TRAFs家族有七个成员(TRAF1-TRAF7)。在TRAFs家族中,TRAF6与众不同,它具有独特的受体结合特异性。TRAF6是两个研究小组独立克隆出来的。一个小组通过查找TRAF2样序列的DNA数据库,然后通过cDNA文库筛选得到的。另一个小组是将CD40作为诱饵,通过酵母双杂交筛选得到的。TRAF6是IL-1R/TLR家族和TNFR超家族的重要接头分子,能调节包括先天性免疫、获得性免疫、骨代谢在内的多个生理过程。在前期的工作中,我们已经通过GST pull-down和免疫沉淀实验证实了IFN-λR1的胞内区能与TRAF6相互作用。为了研究IFN-λR1全长和TRAF6的相互作用,我们进行了外源性免疫共沉淀实验和半内源性免疫共沉淀实验。为了研究IFN-λR1全长和TRAF6相互作用的功能及所涉及到的信号通路,我们进行了NF-κB启动子实验和体内泛素化实验。在研究中,我们发现1.外源性免疫共沉淀实验和半内源性免疫共沉淀实验证实了IFN-λR1全长和TRAF6的相互作用。2. IFN-λ1能够抑制TRAF6引起的NF-κB的激活。3. IFN-λR1能够抑制TRAF6自身的泛素化。