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目的:观察人羊膜匀浆上清液对兔角膜上皮细胞的生长和增殖的影响,观察人羊膜匀浆上清液促进兔角膜碱烧伤后角膜上皮和基质修复的作用,为临床上用人羊膜匀浆上清液点眼治疗眼碱烧伤提供理论依据? 方法: 1. 体外实验:将兔角膜上皮细胞离体培养,用MTT 比色法观察羊膜匀浆上清液在不同浓度(培养液中羊膜匀浆蛋白含量分别为40?80?160μg/ml)条件下和不同时相点(24、48、96h)时对兔角膜上皮细胞培养增殖的影响? 2. 动物活体实验:先取8 只(16 眼)家兔随机分为4 组:生理盐水对照组?1:1 羊膜匀浆组、1:2 羊膜匀浆组、1:3 羊膜匀浆组、每组2 只兔子4 只眼,碱烧伤后每天行荧光素染色并在裂隙灯下观察角膜上皮愈合情况,每组在术后第1 天、第3 天、第7 天照相,根据角膜上皮愈合情况最后选择1:2 羊膜匀浆组为实验组? 然后取15 只家兔(30 只眼)分为3 组:对照组(生理盐水点眼)、羊膜匀浆组(1:2 羊膜匀浆点眼)、bFGF 组(贝复舒眼液点眼),碱烧伤后每天行荧光素染色并在裂隙灯下观察角膜上皮愈合情况,每组在术后第1 天、第3 天、第5 天、第7 天和第14 天照相观察角膜上皮愈合率和新生血管生长面积率情况,第1 天、第3 天、第7 天、第14 天取材观察胶原纤维排列? 成纤维细胞数量. 结果: 1. 角膜上皮细胞增殖检测:随着时间的延长(24、48、96 小时),角膜上皮细胞增殖相差显著(P<0.05),随着羊膜匀浆上清液浓度增高(40μg/ml?80μg/ml?160μg/ml),角膜上皮细胞增殖相差显著(P<0.05)。2. 角膜上皮愈合率:兔角膜碱烧伤后第1 天和第3 天,羊膜匀浆组与bFGF 组、对照组相比,差异显著(P<0.05), bFGF 组和对照组间无显著差异(P>0.05) 、第5 天、第7 天,羊膜匀浆组?bFGF 组和对照组间相比差异非常显著(P<0.01),而羊膜匀浆组和bFGF组间无显著差异(P>0.05)。3. 角膜新生血管面积率:碱烧伤后第7 天和第14 天,各组间新生血管面积率均无显著差异(P>0.05)? 5. AgNOS 染色成纤维细胞计数:对染色切片行成纤维细胞计数(每张切片随机选3个视野,×1000),每组3 张切片,取其平均数行统计学处理,碱烧伤后第7 天羊膜匀浆组与