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茶叶籽油,山茶科山茶属茶树(Camellia sinensis O’Ktze)的成熟种子-茶叶籽中所取得的植物油。茶叶籽油富含不饱和脂肪酸,毛油室温下可贮藏1-2年,作为我国的新型食用油,茶叶籽油已受到国内外广泛的关注。然而,对于茶叶籽油中极性伴随物的分离纯化及其单体物质抗氧化活性的研究报道较少,无法阐述茶叶籽油中极性伴随物结构以及在油脂氧化过程中的作用。因此,本论文以茶叶籽油为研究对象,首先对比不同提取方法对茶叶籽油极性伴随物的影响并优化茶叶籽油极性伴随物的提取工艺;其次以大孔树脂AB-8富集极性伴随物,采用柱层析与制备型液相色谱相结合的方法分离纯化极性伴随物单体,初步分析其物质组成;最后通过体外化学实验和细胞模型研究极性伴随物质的抗氧化活性,筛选具有高抗氧化活性的单体物质。获得如下结果:(1)以鄂茶10号茶叶籽为研究对象,分别对比溶剂法、碱解法、酸解法以及酶解法对所提取茶叶籽油极性伴随物的影响,经过碱解后提取茶叶籽油极性伴随物的物质组成较多且抗氧化活性最高,EC50值为125.37±1.28μM。最终确定茶叶籽油极性伴随物的最佳提取工艺为:碱解法提取,NaOH浓度为2.0mol/L,提取的料液比为1:5,提取温度为45℃,提取时间为3 h,碱解后需调节pH为2。此条件下提取的茶叶籽油极性伴随物的酚类物质量为 118.35± 1.65 mg/kg,EC50 值为 112.83±1.34μM。(2)以大孔树脂AB-8为茶叶籽油极性伴随物的富集、初步分离填料,最佳的分离纯化条件为:上样的样品浓度为0.5mg/mL,上样体积为4BV,上样流速为1BV/h,洗脱剂乙醇体积分数为60%,洗脱流速为1 BV/h,洗脱剂体积为5 BV,此工艺条件下,茶叶籽油极性伴随物的纯度由45.83%提高到68.53%,极性伴随物的回收率为78.83%。大孔树脂分段洗脱得.四个组分,制备型液相色谱对组分1分离制备的最佳工艺条件为:进样体积为60 mL,洗脱流速为20 mL/min;对组分2,3分离制备的最佳工艺条件为:进样体积为80 mL,洗脱流速为15 mL/min。再经Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析得6种化合物1、3、5、10、13、18。经过液质分析,初步推断化合物1为阿魏酸,化合物13为咖啡酸肉桂酯。(3)采用化学法(DPPH、ABTS法)与细胞抗氧化(CAA)实验对茶叶籽油极性伴随物单体的抗氧化活性进行研究。上述方法均表明6种极性伴随物单体均具有一定的抗氧化性能,化合物1、3、5、10、13、18的CAA抗氧化能力值分别为42.89±2.34、8.46±0.23、12.08±0.29、20.45±1.89、50.22±2.75、10.33±0.9μmol槲皮素当量/100μmol,抗氧化能力:化合物3>化合物5>化合物1>化合物18>化合物13>化合物10(p<0.05)。