拟南芥IQM2参与自主途径成花调控的功能解析

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拟南芥AT3G13600编码的IQM2含有1个IQ基序,是一个钙调素结合蛋白(calmodulin-binding protein,CaMBP),IQM2基因的突变体表现出迟花表型。从营养生长到生殖生长的开花转型是植物生命周期的一个关键和复杂的过程,需要对多样的环境因素和内源信号进行综合响应。在拟南芥中有六条既独立又相互联系的调控开花时间的途径已被确定,包括光周期、春化、赤霉素、温度、自主和年龄途径。本论文对拟南芥IQM2基因参与自主途径成花调控的遗传途径进行了研究,得到以下结果:1.构建了植物瞬时表达载体P35s:IQM2-GFP,并转入叶肉细胞原生质体,初步判断IQM2定位在叶绿体和细胞核。2.利用PCR和RT-PCR,对IQM2的两个新的T-DNA插入突变体iqm2-3和iqm2-4进行了鉴定。结果显示,iqm2-3和iqm2-4都是IQM2的功能缺失突变体。3.通过长日照实验,对iqm2-3和iqm2-4的成花表型进行了分析。结果显示,iqm2-4比Ler迟开花2-3天,iqm2-3比Col迟开花0-1天,开花时iqm2-4的莲座叶数量较其野生型多1片,iqm2-3的莲座叶数量与其野生型相比无明显差异。进一步印证IQM2涉及成花调控。4.经过抗性筛选,获得4株iqm2-2互补转基因纯合子,并进行长日照下的成花表型观察。长日照条件下iqm2-2比Ler迟花3天,iqm2-2互补株系与Ler相似;开花时iqm2-2的莲座叶数量较其野生型多1-2片,iqm2-2互补株系的与Ler的相似。说明iqm2-2的迟花表型源于IQM2基因的突变。5.利用RT-PCR和RT-qPCR技术,对植物不同时期IQM2和FLC的基因表达进行了分析,并对成花关键期自主途径不同基因的表达进行了分析。结果显示,成花关键期IQM2的表达量较高,进一步说明IQM2参与成花调控;FLC在iqm2-2和Ler的叶片中的表达皆表现为抽薹时强烈,抽薹后下调;而且,成花关键期叶片和茎尖的FLC的表达量均以iqm2-2的为高。这与IQM2突变体的晚花表型相符,进一步说明IQM2涉及自主途径成花调控。其他自主途径成花调控基因在iqm2-2和Ler中的表达均无显著差异,提示IQM2是自主途径的新调节子,并可能通过调节FLC的表达量而间接促进开花。6.构建了P35s:HA-IQM2植物超表达载体。概言之,IQM2参与自主途径成花调控。
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