【摘 要】
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帕金森综合症(PD)是常见于中老年人的一种神经变性疾病。由于α-突触核蛋白(α-syn)会产生基因突变,因此科学家们常将其与PD的发病机制联系起来。研究表明,其可溶性寡聚物会
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帕金森综合症(PD)是常见于中老年人的一种神经变性疾病。由于α-突触核蛋白(α-syn)会产生基因突变,因此科学家们常将其与PD的发病机制联系起来。研究表明,其可溶性寡聚物会破坏神经细胞突触功能和细胞中的离子梯度,具有很强的神经毒性。作为PD的早期诊断生物学标志物之一,α-syn寡聚体的高效、灵敏检测对疾病的预防和患者病情的判断有着重大意义。目前,α-syn寡聚体的检测方法主要有质谱法、荧光法、毛细管电泳、表面等离子体共振和酶联免疫吸附法等。然而,这些方法或多或少还存在一些不足,如价格高昂,操作繁琐等。因此,设计开发一种灵敏、便捷、快速的检测方法具有十分重大的意义。电化学发光(ECL)适体传感器因其高灵敏度、低成本和良好的选择性已成为了各类生物标志物检测的选择之一。本研究中制备了两种以适体作为α-syn寡聚体识别元件的ECL生物传感器。利用金属有机骨架(MOFs)材料功能化氧化铟锡玻璃,提供了良好的平台。我们分别使用3-氨基丙基三甲氧基硅烷的水解产物或戊二醛作为金纳米颗粒/MOFs复合物(AuNPs@MOFs)或单一 MOFs材料的连接剂,制备得到两种纳米修饰电极。在前述两种电极上,使用鲁米诺作为发光试剂,在弱碱性条件下也能产生很强的ECL发射。此后,再分别通过Au-S键或酰胺键将巯基化或羧基化的适配体连接到MOFs功能电极上,α-syn寡聚体与适体特异性结合产生较大的空间位阻显著抑制了传感器的ECL信号,最终在ECL信号抑制率与α-syn寡聚体浓度的对数间建立了良好的线性关系(相关系数分别为0.999和0.995),线性范围分别为2.43 fM-0.486 pM和1.39 fM~0.243 pM,检测限分别低至0.42 fM和0.38 fM。两种适体传感器均具有高灵敏度和良好的选择性、重现性,可用于检测人体血清中的α-突触核蛋白寡聚体。
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