曲霉低分子量纤维素酶的研究

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AspergillusL-22产生的纤维素酶,具有外切酶活性极低而内切酶活性较高的特点,可适用于纸浆脱墨等工艺.对固体发酵培养液的再分离,发现在该酶系中含有能够透过截留分子量为5kD的超滤膜的纤维素酶组分.尝试几种层析介质,找到分子量纤维素内切酶的较适宜的纯化方案.在Native-PAGE中,两组分不能被考马斯亮蓝染色,后经银染,两组分均可被染色.组分LM-Ⅰ在SDS-PAGE和Native-PAGE都处于溴酚蓝的前沿,估计组分LM-Ⅰ的分子量为14.2kD.LM-Ⅱ经SDS-PAGE电泳,测量分子量为27.3kD;Native-PAGE活性显示表明两组分同时具有纤维素酶活和木聚糖酶活.在对活性组分水解圈的研究发现,不同分子量的酶组分,水解圈的状态不同.相同蛋白浓度下,分子量大的内切酶,水解圈直径小而透明度高;分子量小的酶,水解圈直径大而透明度低.这说明低分子量的酶分子更易于在底物内部的复杂孔隙中扩散,增大酶与底物的接触机率,提高降解纤维素的速度.
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