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目的:观察重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO)对高浓度葡萄糖作用下体外培养的大鼠视网膜Muller细胞凋亡及对Clusterin(CLU)表达的影响,并探讨其可能机制。方法:将新生3d的Sprague-Dawley(SD)大鼠视网膜分离为小组织块,酶消化法进行体外培养、纯化。取第3代纯化的大鼠视网膜细胞进行HE染色、透射电镜及免疫细胞化学染色鉴定。将纯化的大鼠视网膜Muller细胞随机分为高浓度葡萄糖培养组、空白对照组和高糖加各浓度rhEPO处理组,每组设4个复孔。rhEPO处理组在高浓度葡萄糖培养液中分别加入终浓度为5 kU/L、10 kU/L、20 kU/L、40kU/L rhEPO,培养48h后MTT法检测Muller细胞活力,透射电镜观察各组细胞结构变化,酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液中CLU蛋白的表达,SP免疫细胞化学法测定细胞内CLU蛋白的表达。结果:纯化MUller细胞HE染色见细胞形态狭长或不规则,胞质丰富,细胞核椭圆形。透射电镜下可见纯化Mulller细胞胞体大,胞质细胞器丰富,内含有大量的8-l0nm的特征性微丝,表面有微绒毛。GS免疫细胞化学染色显示纯化Muller细胞大部分GS染色阳性,酶消化法培养的大鼠视网膜Muller细胞纯度可达到900%以上。各组细胞培养48后,高糖组与正常对照组相比Muller细胞外CLU蛋白表达减少,细胞内CLU增加,差异有统计学意义(P<0.05)。高糖加不同浓度rhEPO组随着加入rhEPO浓度的不断增加,细胞外sCLU逐渐升高,细胞内nCLU逐渐减低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:rhEPO能减少体外培养高浓度葡萄糖状态下大鼠视网膜Muller细胞的凋亡,其机制可能是通过上调抗细胞凋亡的sCL.U,下调促细胞凋亡的nCLU,并最终导致sCLU/nCLU向抑制凋亡比值调节,起到保护细胞的作用。