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急性肝损伤（Acute liver injury,ALI）是指由多种诱因造成肝脏在短时间内出现病理损伤的过程。肝脏具有强大的再生潜力,轻微的急性肝损伤可通过肝细胞增殖进行自身修复,而肝脏持续性损伤能引起肝纤维化进而演变成难以逆转的肝硬化甚至肝癌。目前,治疗急性肝损伤的保肝药物种类繁多,但长期服用可使机体产生耐药性,从而影响治疗效果。因此,寻找新的治疗药物对控制ALI尤为重要。木犀草素是存在于金银花等许多植物中的天然黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎等多种药理活性。但其对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤是否具有保护作用及其机制尚不清楚。目的:本研究通过建立四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型,初步探讨木犀草素对小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法:1.将雄性C57BL/6小鼠按体重随机分为空白组,模型组,木犀草素（Lut）15、30、60 mg/kg组。空白组和模型组分别灌胃（ig）给予0.5%CMC-Na 20m L/kg,其余各组ig给予相应药物20 m L/kg,1次/天,连续给药7天。末次给药后1 h空白组小鼠腹腔注射（ip）橄榄油10 m L/kg,其余各组小鼠ip 0.25%CCl410 m L/kg建立急性肝损伤模型,造模期间禁食不禁水。24 h后,ip 1%戊巴比妥钠麻醉小鼠后采集血液和肝组织。采用生化试剂盒分别检测小鼠血清中AST、ALT活性和肝组织中GSH、MDA含量;HE染色观察肝组织形态改变;qRT-PCR检测肝组织中TFR1、FTH1 mRNA水平;Western Blot检测肝组织中GPX4和Nrf2信号通路相关蛋白表达。2.将雄性C57BL/6小鼠按体重随机分为空白组,模型组,ML385（30 mg/kg）组、Lut组和Lut+ML385组。空白组、模型组和ML385组分别ig给予0.5%CMC-Na 20 m L/kg,Lut组和Lut+ML385组分别ig给予Lut 20 m L/kg,1次/天,连续给药7天。在第6、7天药前1 h,ML385组和Lut+ML385组ip ML385溶液10 m L/kg。末次药后1 h空白组小鼠ip橄榄油10 m L/kg,其余各组小鼠ip0.25%CCl410 m L/kg建立急性肝损伤模型。24 h后,ip 1%戊巴比妥钠麻醉小鼠后采集血液和肝组织。采用生化试剂盒检测小鼠血清中AST和ALT活性;HE染色观察肝组织形态变化;qRT-PCR检测肝组织中FTH1和TFR1 mRNA表达变化;Western Blot检测肝组织中GPX4和Nrf2信号通路相关蛋白表达。结果:1.木犀草素对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用（1）小鼠肝脏大体显示:空白组小鼠肝脏表面光滑且富有光泽;模型组小鼠肝脏表面具有颗粒感;Lut 15、30和60 mg/kg均能改善这种形态改变,表现为肝脏颜色和质地逐渐趋于正常。HE染色结果显示:空白组小鼠肝组织结构正常,肝细胞大小均一,未出现异常形态学改变;模型组小鼠肝组织损伤严重,表现为肝细胞肿大、肝小叶完整性受损且出现细胞坏死;Lut各组肝组织结构逐渐恢复正常且肝细胞排列有序。（2）生化指标结果显示:与空白组比较,模型组小鼠血清中AST和ALT活性、MDA含量均显著升高,GSH含量显著降低（P＜0.01或P＜0.05）;与模型组比较,Lut 15 mg/kg可显著升高小鼠肝脏中GSH含量,降低MDA含量（P＜0.01）;Lut 30和60 mg/kg均能显著升高GSH含量,显著降低血清中AST和ALT活性、MDA含量（P＜0.01）。（3）qRT-PCR结果显示:与空白组比较,模型组小鼠肝组织中TFR1 mRNA水平显著升高,FTH1 mRNA水平显著降低（P＜0.01）;与模型组比较,Lut 15、30、60 mg/kg均能显著降低肝组织中TFR1 mRNA水平,升高FTH1 mRNA水平（P＜0.01）。（4）Western Blot结果显示:与空白组比较,模型组小鼠肝组织GPX4、Nrf2、HO-1和SCL7A11表达水平显著降低（P＜0.01或P＜0.05）,与模型组比较,Lut 60 mg/kg可显著升高肝组织中GPX4、Nrf2、HO-1和SCL7A11表达水平（P＜0.05）。2.木犀草素对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤保护作用的机制研究（1）小鼠肝脏大体显示:空白组小鼠肝脏颜色正常且表面光滑;模型组小鼠肝脏表面呈颗粒感且暗淡无光;ML385组小鼠肝脏表面具有颗粒感;Lut组小鼠肝脏表面有光泽;Lut+ML385组小鼠肝脏表面无光泽且颜色偏暗。HE染色结果显示:空白组小鼠肝小叶完整,肝组织结构无异常,无肝细胞坏死现象;模型组小鼠肝组织排列混乱,肝细胞结构不完整且出现细胞坏死;ML385组小鼠肝组织排列无规律且出现大量细胞坏死;Lut组小鼠肝组织结构趋于正常,肝细胞排列逐渐有规律;Lut+ML385组小鼠肝组织结构不完整。（2）生化指标结果显示:与空白组比较,模型组小鼠血清中AST和ALT活性均显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,Lut组小鼠血清中AST和ALT活性均显著降低,ML385组小鼠血清中AST和ALT活性均显著升高（P＜0.05）;与Lut组比较,Lut+ML385组可显著升高小鼠血清中AST和ALT活性（P＜0.05）。（3）qRT-PCR结果显示:与空白组比较,模型组小鼠肝组织中TFR1 mRNA水平显著升高,FTH1 mRNA水平显著降低（P＜0.01）;与模型组比较,Lut组小鼠肝组织中TFR1 mRNA水平显著降低,FTH1 mRNA水平显著升高,ML385组小鼠肝组织中TFR1 mRNA水平显著升高,FTH1 mRNA水平显著降低（P＜0.01）;与Lut组比较,Lut+ML385组可显著升高TFR1 mRNA水平,降低FTH1 mRNA水平（P＜0.01）。（4）Western Blot结果显示:与空白组比较,模型组小鼠肝组织中GPX4、Nrf2、HO-1和SCL7A11蛋白表达显著降低（P＜0.01或P＜0.05）;与模型组比较,Lut可显著升高小鼠肝组织中GPX4、Nrf2和SLC7A11蛋白表达（P＜0.01或P＜0.05）,ML385组小鼠GPX4、Nrf2蛋白表达显著降低（P＜0.01）;与Lut组比较,Lut+ML385组可显著降低小鼠肝组织中GPX4、Nrf2和SLC7A11蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01）。结论:木犀草素能显著降低急性肝损伤小鼠血清中AST、ALT活性,减轻肝组织病理损伤,缓解铁代谢紊乱,抑制铁死亡进程,对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤具有保护作用,该作用可能与激活Nrf2信号通路有关。