酪丝亮肽对肝癌肺转移的治疗作用

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目的:观察三肽化合物酪丝亮肽(Tyroserleutide, YSL)对人肝癌细胞肺转移的抑制作用,初步探讨其抑制肝癌细胞肺转移的机制。方法:1.采用尾静脉接种人肝癌细胞的方法建立裸鼠肝癌细胞的肺转移模型来观察YSL对肝癌细胞肺转移的抑制作用。2.应用Transwell小室实验模型观察不同浓度的肺组织粗提物对肝癌细胞MHCC97H和SK-HEP-1的诱导能力,寻找最佳诱导浓度。3.应用Transwell小室实验模型观察YSL对肺组织粗提物诱导的体外培养的两种人肝癌细胞株侵袭能力的影响。4.应用明胶酶谱分析法,观察YSL对经肺组织粗提物培养的两种人肝癌细胞株细胞培养上清中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs) MMP-2和MMP-9蛋白活性的影响。5.应用免疫印迹技术观察YSL对经肺组织粗提物培养的两种人肝癌细胞株细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。6.应用实时荧光定量PCR法观察YSL对经肺组织粗提物培养的两种人肝癌细胞株细胞中MMP-2和MMP-9mRNA水平的影响。结果:1.YSL可以显著抑制裸鼠体内肝癌细胞转移至肺内的肿瘤灶数。2.不同浓度肺组织粗提物诱导人肝癌细胞的移动侵袭实验中,在一定浓度范围内随着肺粗提物浓度的提高其穿过下室的细胞数增多,与培基对照组比较具有显著差异。3.YSL可以显著抑制经肺组织粗提物诱导的细胞的体外侵袭能力。4.YSL可以显著抑制肝癌细胞培养上清中MMP-2和MMP-9的蛋白活性。5.YSL可以显著抑制肝癌细胞中MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平。6.YSL可以显著抑制肝癌细胞中MMP-2和MMP-9的mRNA表达水平。结论:YSL具有抑制肝癌细胞肺转移的作用。体外研究表明肺组织粗提物具有明显的诱导肝癌细胞的作用,YSL对经肺组织粗提物诱导的肝癌细胞侵袭能力有明显的抑制作用,具有抗肝癌细胞肺转移的效果。该作用可能是通过下降基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的表达水平、抑制其活性来实现的。
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