【摘 要】
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黄瓜(Cucumis sativus L.)是葫芦科甜瓜属植物,广泛种植在世界各地,是我国重要的栽培蔬菜之一。果实亮度是黄瓜重要的外观品质性状,也是影响黄瓜商品价值的重要因素。挖掘影响黄瓜亮度的关键基因并解析其调控机制可为黄瓜品质改良提供理论基础和技术支撑。本研究以欧洲水果型黄瓜自交系’DDX’和华北型黄瓜自交系’JY35’及以二者为基础构建的重组自交系为材料,在’DDX’和’JY35’中分别精细
【基金项目】
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江苏省农业科技自主创新基金项目(编号:CX(20)3165); 江苏省农业重大新品种创制项目(PZCZ201720); 江苏省种业振兴“揭榜挂帅”项目(JBGS[2021]018); 江苏省双创博士项目和扬州市绿杨金凤项目
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黄瓜(Cucumis sativus L.)是葫芦科甜瓜属植物,广泛种植在世界各地,是我国重要的栽培蔬菜之一。果实亮度是黄瓜重要的外观品质性状,也是影响黄瓜商品价值的重要因素。挖掘影响黄瓜亮度的关键基因并解析其调控机制可为黄瓜品质改良提供理论基础和技术支撑。本研究以欧洲水果型黄瓜自交系’DDX’和华北型黄瓜自交系’JY35’及以二者为基础构建的重组自交系为材料,在’DDX’和’JY35’中分别精细定位1个影响黄瓜果实亮度的基因即 glossypericarp 1(glp1)和glossy periarp 2(glp2),并进行了基因功能研究。主要结果如下:1、以亮果型欧洲水果黄瓜’DDX’和暗果型重组自交系’93-46’为材料,在’DDX’中定位到一个影响黄瓜亮度的隐性基因glp1。glp1位于Chr5的111.6 kb区间内,该区间包括10个候选基因。结合基因组序列和基因表达分析,确认编码C2H2类锌指蛋白CsZFP6的CsaV35G028870为候选基因,’DDX’中CsZFP6完全缺失而呈现亮果皮特征。在115份黄瓜自然群体中对候选基因CsaV35G028870进行了序列分析,含有Csglp1DDX的黄瓜资源呈现亮果皮表型,而含有CsGLP1JY35的黄瓜资源则显示出相对暗淡的外观;地理分布分析表明,来自东亚类群的黄瓜品系高度富集CsGLP1JY35等位基因,而大多数亮果型黄瓜品系来自欧亚大陆类群。基于亲本间候选基因位点序列差异信息开发出与glp1紧密连锁的SNP标记SNP004能高效鉴别黄瓜品种的果皮亮/暗表型,可用于分子标记辅助育种。2、根据RNA-seq及后续的KEGG分析,’DDX’的亮度表型可能与蜡质合成相关。通过GC-MS和qRT-PCR证实,’DDX’果皮中的蜡质含量及相关基因表达量下调。进一步进行烟草瞬时转化实验,显示CsZFP6能转录激活蜡质相关基因CsMAH1、CsKCS2、CsLTP2 和 CsCER1的表达。3、以华北型黄瓜自交系’JY35’(亮果)和重组自交系’93-22’(暗果)为亲本产生的F2分离群体为材料,在’JY35’中鉴定到一个影响黄瓜亮度的隐性基因glp2。glp2被定位至Chrl的510.71 kb区间内,该区间包括26个候选基因。在26个候选基因中有4个基因的表达量存在显著差异(CsaV31G030150、CsaV31G030200、CsaV3 1G030240、CsaV3 1G030300)。4、glp1和glp2之间存在一定的上位性和加性效应。基因型Csglp1Csglp1CsGLP2CsGLP2 和 Csglp1Csglp1Csglp2Csglp2 的重组自交系均呈现亮果表型,即具有Csglp1位点的黄瓜无论是否具有Csglp2,其果实均为亮果型;基因型Csglp1Csglp1Csglp2Csglp2的黄瓜果实光泽度值高于基因型Csglp1Csglp1CsGLP2CsGLP2 和 CsGLP1CsGLP1Csglp2Csglp2,表明两个位点之间具有加性效应。
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