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冠心病的治疗方法有药物治疗和包括经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)和冠状动脉旁路移植术(CABG)的再血管化治疗。有相当一部分冠心病患者无法进行以上治疗或疗效不佳，使用促血管生长因子促进新生血管生成是一种可能有效的的治疗手段，被称为“治疗性血管生成”或“分子搭桥”。我们尝试直接经心肌注射携带血管内皮细胞生长因子121(VEGF121)基因的质粒，检测其在缺血心肌中的表达，并评价其对慢性心肌缺血的治疗作用。 第一部分 评价Ameroid缩窄环制作的慢性缺血心脏模型 目的：评价Ameroid慢性缩窄环制作的慢性缺血心脏模型。方法：20只小型猪，左侧开胸将慢性缩窄环套入冠状动脉左回旋支(LCX)近端。四周后冠状动脉造影，心肌灌注单电子发射计算机断层扫描(SPECT)和负荷超声心动图进行评价。结果：20只小型猪中1只冠状动脉无明显狭窄，3只室壁瘤形成。其余16只均表现为LEX 75％-100％狭窄，心肌灌注SPECT显示左室外侧壁为主心肌低灌注，超声心动图呈现静息时左室外侧壁运动降低，小剂量多巴酚丁胺静脉泵入时运动增强现象，提示左室外侧壁心肌处于缺血但存活状态。两只评价为慢性缺血模型的猪心行病理检查，心肌组织表现为弥漫心肌细胞变性，散在小灶状的纤维组织增生，提示为慢性缺血后继发改变。结论：Ameroid缩窄环可以制出较好的慢性缺血的猪心模型。 第二部分 检测VEGF121质粒在缺血心肌中的表达 目的：在缺血心肌上检测pcDNA-VEGF121直接经心肌注射后的表达。方法：使用QIAGEN去内毒素质粒提取试剂盒大量提取和纯化pcDNA3-VEGF121和pcDNA3-LacZ质粒，酶切鉴定后备用。慢性缺血小型猪2只(第一部分证实)，左室外侧壁注射质粒pcDNA-VEGF121或pcDNA-LacZ 100μg／500μl，一周后，RT-PCR检测心肌中外源VEGF mRNA的表达，western印迹法检测VEGF蛋白水平。