目的研究在糖尿病大鼠肾脏中TSP-1表达是否增高,是否导致活性TGF-β1增高,阻断TSP-1介导的TGF-β1活化能否延缓糖尿病肾病的纤维化进程,从而为临床上糖尿病肾病的防治提供新的思路。方法选取健康雄性Wistar大鼠42只,随机分成模型组和正常对照组(A组),用链脲佐菌素(STZ)按60mg/kg一次性腹腔注射诱导糖尿病模型,将糖尿病模型组大鼠随机分为糖尿病大鼠对照组(B组)和糖尿病大鼠治疗组(C组),药物治疗组从STZ注射糖尿病模型建立成功后即刻开始给于TSP-1特异性拮抗剂即:人工合成多肽(LSKL)100μg/d皮下注射,直至实验结束,未治疗组B组和正常对照组A组大鼠给予同等剂量生理盐水,分别测定治疗不同时期糖尿病大鼠C组血肌酐、肌酐清除率、血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白、24 h尿蛋白定量、尿微量白蛋白排泄率(UAER)与A组、B组同时期结果进行比较。第24周用HE及PAS染色观察各组肾脏病理形态学改变、测定肾重、肾脏肥大指数(KW /BW)及免疫组化检测TSP-1和TGF-β1,并对二者作Pearson直线相关回归分析。结果(1)大鼠存活情况:正常对照组(A组)全部存活;糖尿病肾病对照组(B组)第20、51、93、108天各死亡1只;糖尿病肾病治疗组(C组)第98天死亡1只;(2)一般状况:正常对照组(A组)大鼠状态良好,毛色光泽,反应灵敏,体重增加。糖尿病大鼠对照组(B组)大鼠出现典型摄食量、饮水量及尿量增加,体重明显减轻的糖尿病“三多一少”症状(相对于同时期A组大鼠),毛色灰暗无光泽,活动量少,有2只大鼠出现白内障,1只大鼠反复腹泻,4只大鼠实验过程中死亡。与B组大鼠同时期比较,C组大鼠“三多一少”症状明显改善,毛色光泽,体重增加,提示LSKL能在一定程度上控制糖尿病症状;(3)分别测定糖尿病肾病治疗组(C组)不同时期24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白排泄率、血清肌酐及肾功能情况与B组相比较明显降低,差别显著(P<0.01);但比同期正常对照组略高,差别显著(P<0.01);(4)血糖、糖化血红蛋白及血脂情况:各糖尿病组(B组和C组)大鼠的血糖、糖化血红蛋白及血脂均较正常对照组大鼠(A组)明显升高(P<0.01),而各糖尿病组之间血糖并无显著差异(P>0.05),C组糖化血红蛋白及血脂较B组有不同程度的下降(P<0.05);(5)第24周时分别观察三组大鼠肾组织病理形态学改变(肾小球硬化、间质纤维化、肾小管萎缩、血管内膜病变等),测定肾重、肾脏肥大指数(KW /BW)、肾小球平均体积(MGV)、系膜面积比(FMA),糖尿病肾病治疗组(C组)明显较轻,与B组相比,差别显著(P<0.05);但糖尿病肾病组(B组和C组)以上改变均较正常对照组(A组)明显加重,差别显著(P<0.05);(6)第24周时运用免疫组化方法观察肾组织TSP-l在正常对照组无阳性表达,TGF-β1仅有少量表达,而糖尿病肾病组(B组、C组)TSP-l在肾小管上皮细胞胞浆、肾小球壁层上皮细胞内阳性表达,在炎性浸润及纤维化的间质区表达更明显,与正常对照组(A组)相比,差别显著(P<0.01);TGF-β1阳性表达面积也显著增强,可见于肾小球系膜细胞、肾小球壁层上皮细胞、肾小管上皮细胞、肾间质细胞,与正常对照组相比,差别显著(P<0.01);糖尿病治疗组、糖尿病对照组TSP-l、TGF-β1阳性表达面积及强度差别显著(P<0.05),TSP-l与TGF-β1阳性表达经Pearson直线相关回归分析具有正相关(r=0.476,P<0.05)。结论(1)糖尿病大鼠肾组织内TSP-1、TGF-β1存在高表达;(2) TSP-1介导TGF-β1活化是糖尿病大鼠肾脏纤维化的重要机制;(3) LSKL能特异性阻断TSP-1介导的TGF-β1活化,总体TGF-β1含量明显减少,表明:LSKL能明显延缓糖尿病大鼠肾纤维化进程,从而为糖尿病肾病的防治提供新的思路。