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研究背景及目的:FLT3(Fms-like tyrosine kinase-3)属于III型受体酪氨酸激酶(Rcceptor Tyrosine Kinase,RTK)家族成员,在与其配体FL(FLT3 ligand,FL)结合后,使酪氨酸残基磷酸化,并通过各种胞浆蛋白传导激活信号,提供增值刺激,促进白血病恶性克隆的增值与维持。近年来,有许多研究发现FLT3基因出现内部串联重复(internal tandem duplication,ITD)突变导致近膜结构域(juxtamembrane domain,JM)延长,也称FLT3长度突变(FLT3 length mutation,FLT3-LM),且发生FLT3-LM的患者具有相对特异的临床特征。发生突变的FLT3受体在配体非依赖的情况下发生自动磷酸化和组成性激活,引起下游异常的信号传导,在造血系统恶性疾病的发生发展中具有重要作用。一些AML细胞共表达FLT3和FL,两者可能通过自分泌,旁分泌形式发生FLT3受体的活化,FLT3的高表达水平可能通过野生型FLT3正常信号传导的强化方式,在白血病发病中发挥重要作用。已有一些研究小组报道了白血病细胞中FLT3转录水平的高表达,且发现FLT3表达水平与临床预后密切相关。而采用流式细胞仪(FCM)技术研究急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓单个核细胞表面FLT3受体表达情况,并分析其临床意义,迄今为止,国内尚未见报道。本试验旨在研究我中心FLT3-LM在AML患者及各亚型中的发生率,及其与白血病发生、发展的关系,探索FLT3-LM在白血病治疗和预后判断中的应用价值。另外检测FLT3受体在AML患者及其各亚型中单个核细胞(mononuclear cells.,MNC)的表达水平,探讨其作为AML患者的预后判断指标意义。方法:本研究分两部分。第一部分:采用基因组DNA聚合酶链反应(PCR)技术检测95例初治AML,22例初治急性淋巴细胞白血病(ALL),对照组10例健康人骨髓FLT3基因长度突变(FLT3-LM)发生率,分析FLT3-LM阳性患者的临床特征。第二部分:采用流式细胞仪(FCM)检测其中68例AML患者及其正常对照组单个核细胞(MNC)的FLT3表达水平,同时分析FLT3-LM阴性AML患者不同FLT3表达水平患者的临床特征,以及FLT3-LM阴性AML患者其与FLT3-LM阳性之间的关系。结果:1.1采用PCR技术,95例AML患者中15例检测到FLT3-LM阳性,突变率为15.8%。其中18例M1中3例(16.6%),24例M2中4例(16.6%),17例M3中2例(11.8%),25例M5中5例(20%),4例M6中1例检测到阳性(25%)。各亚型突变率无统计学差异。22例ALL和10例正常对照中均未检测到FLT3-LM阳性。1.2 FLT3-LM在52例正常染色体核型组和12例伴t(15;17)核型异常患者中分别检测到10例和2例,突变率分别为23.0%和16.7%,较23例其他核型组突变率(4.3%)高,但无统计学差异;FLT3-LM组与非突变组在年龄,性别方面无统计学差异(P>0.05); FLT3-LM阳性患者外周血白细胞高,骨髓原始细胞高(P<0.05)。1.3FLT3-LM组与非突变组在诱导缓解率,总生存时间方面无统计学差异(P>0.05)。2.1采用FCM技术,68例AML患者中FLT3表达水平为(11.48±14.87)%,高于正常对照组水平(1.10±0.31) %(P<0.05);FLT3表达水平在12例突变组为(5.86±6.85)%,低于56例非突变组(14.14±16.25)% (P<0.05)。2.2FLT3表达水平在11例M1,18例M2,10例M3,5例M4,21例M5中分别为(11.76±10.68)%, (11.17±18.75)%,M3(17.79±21.21)%,M4 (15.84±18.82)%,M5 (12.50±12.13)%,各亚型中无统计学差异( P>0.05)。在7例t(15;17)核型组,38例正常核型组与7例复杂核型组间表达水平分别为(22.23±23.13)%,(13.00±16.00)%,(7.33±6.95)%,亦无统计学差异。2.3临床资料显示,诱导治疗后缓解组的FLT3表达水平为(5.52±2.67) %,低于非缓解组FLT3表达水平(25.53±22.60) %(P<0.05)。结论:FLT3长度突变是AML中发生频率较高的一类突变;突变患者临床特征表现为外周血高白细胞,骨髓高原始细胞;FLT3长度突变与诱导缓解率和总生存时间无关。FLT3受体在AML患者单个核细胞中呈高水平表达,且与CD34表达水平非同步;FLT3受体高表达与低诱导缓解率有关。FLT3突变与FLT3受体水平检测有助于白血病诊断,预后判断和靶向治疗。