论文部分内容阅读
背景与目的肝细胞性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,尽管肝癌的手术治疗、系统化疗、靶向治疗等治疗方式不断进步,但总体而言,肝癌预后并不理想。因此探索更有效的治疗方法显得尤为重要。肿瘤生物治疗被认为是最具有希望的治疗手段之一,而树突状细胞疫苗是肿瘤生物治疗的热点研究领域。本研究从人HCC组织来源的肝癌细胞中分选出CD133+肝癌细胞,制备负载CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞疫苗,并检测DC在体外刺激自体淋巴细胞增殖的能力,为树突状细胞疫苗抗肝癌进一步研究打下坚实的基础。方法采用酶消化法从人HCC组织中分离出肝癌细胞,应用流式细胞术分选出CD133+肝癌细胞,制备负载CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞疫苗,最后应用流式细胞术检测DC的表型,利用酶联免疫反应法测定DC分泌IL-12水平,采用混合淋巴细胞反应法检测DC在体外刺激自体淋巴细胞增殖的能力。结果25例肝癌组织中CD133的表达率在3.8%~8.3%之间,平均值为(5.8±1.6)%。CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞的HLA-ABC、HLA-DR、CD86、CD80、CD83表达水平分别是(96.52±2.02)%、(92.17±3.04)%、(94.25±3.28)%、(55.14±5.27)%、(40.53±2.31)%,与肝癌细胞RNA树突状细胞和成熟DC比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CD133+肝癌细胞RNA-DC、肝癌细胞RNA-DC、成熟DC和未成熟DC分泌IL-12的量分别为(421.50±10.47)pg/ml、(418.20±10.01)pg/ml、(324.20±12.62)pg/ml和(102.47±15.62)pg/ml,前两者之间差异无统计学意义(P=0.14),前两者分别均高于后两者,差异有统计学意义(P<0.05)。CD133+肝癌细胞RNA-DC、肝癌细胞RNA-DC、成熟DC和无DC的自体T淋巴细胞OD490值分别是0.21±0.02、0.20±0.01、0.16±0.03、0.07±0.01,前两者之间差异无统计学意义(P=0.107)。CD133+肝癌细胞RNA-DC的OD490值分别均高于成熟DC和无DC的自体T淋巴细胞(P=0.01,P=0.00)。肝癌细胞RNA-DC的OD490值分别高于成熟DC(mDC)和无DC的自体T淋巴细胞(P=0.00,P=0.00)。结论负载RNA-DC比未负载RNA-DC具有更强的刺激自体T淋巴细胞增殖能力,但CD133+肝癌细胞RNA-DC与肝癌细胞RNA-DC刺激自体T淋巴细胞增殖能力比较差异没有统计学意义。