论文部分内容阅读
含油泥砂的微生物处理法越来越受到人们的关注。石油烃类物质水溶性低,较难被微生物利用。因此获得高效的、可迅速降解原油的微生物菌种是微生物处理含油泥砂技术的关键。本论文通过对含油泥砂中存在的微生物进行富集培养驯化、平板划线分离纯化得到92株以原油为唯一碳源且对原油有一定降解作用的细菌,对原油噬油斑分析初筛出10株菌株,在此基础上以石油烃降解率为考察指标复筛得到1株性能良好的石油烃降解菌。 提取该菌体的基因组DNA,依据实验结果选用Pr2引物进行16S rRNA基因片段的PCR扩增,将产物纯化和测序后进行比对,结合该菌株的菌落形态及镜检形态,确定该菌株属枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。 将优化得到的石油烃降解菌的菌株用于含油污泥中石油烃的降解。用40mL菌液处理20g含油泥砂,7d后降解率达33.52%,60d后降解率达75.14%,90d后降解率达90.53%,90d后菌株的浓度为3.4×105 cfu·mL-1,比起始菌浓(4.1×107 cfu·mL-1)减小了二个数量级。在定期补加营养液的条件下,菌浓基本维持在107 cfu·mL-1,降解率达90%以上的处理时间由原来的90d缩短至60d,当处理时间90d时,降解率可达94%以上。可见定期补加营养剂可大大缩短处理时间,取得更好的效果。对Bacillus subtilis51#的发酵培养基及发酵工艺参数进行优化得到最佳培养基配方和最佳发酵参数,并在最优条件下对其进行10L发酵罐放大,48h菌浓为5.6×108cfu·mL-1。对Bacillus subtilis51#的现场试验发现,生物泥浆法的降解处理效果优于堆肥法,且最适温度为37℃,最适pH为7。实验结果表明本文菌株具有优良的石油烃降解率,可用于油田含油泥砂的处理。