膈下逐瘀汤联合环磷酰胺对Hca-f肝癌小鼠抗肿瘤作用的实验研究

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目的:探讨膈下逐瘀汤(GXZYT)联合环磷酰胺(CY)对Hca-f肝癌小鼠免疫状态和肿瘤间质血管生成的影响。材料与方法:选用50只昆明小鼠接种Hca-f肝癌细胞,10只作为正常组,其余制作动物模型后,随机分成模型组,膈下逐瘀汤组(GXZYT组),环磷酰胺组(CY组),膈下逐瘀汤+环磷酰胺组(GXZYT+CY组),连续8日施加处理因素,停药后次日处死小鼠。观察结果采用施加不同处理因素后体重比较,脾指数比较,胸腺指数比较,光镜观察瘤体内血管数目,电镜观察肿瘤间质血管生成情况,免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)表达及瘤体内微血管密度(MVD)。结果:1.各组小鼠体重比较:模型组和CY组小鼠体重均下降,而模型组的下降最多,GXZYT组与GXZYT+CY组较之模型组均有不同程度的增加,而GXZYT+CY组的体重增加的最多,更接近正常组的小鼠。2.较之模型组,CY组小鼠的脾指数和胸腺指数都下降,而GXZYT组的脾指数和胸腺指数与其都无明显差异,GXZYT+CY组可明显提高脾指数和胸腺指数,更接近于正常组。3.光镜下可见模型组肿瘤间质中新生的毛细血管较GXZYT组、CY组、GXZYT+CY组密集,平均每个高倍镜视野下(200倍)可见到6-11个毛细血管,GXZYT+CY组新生毛细血管数量最少,平均每个高倍镜视野(200倍)下可见到3-6个毛细血管。4.电镜下见模型组肿瘤组织内新生毛细血管,管壁薄,并可见内皮细胞间间隙大,基底膜薄且松散,GXZYT组、CY组、GXZYT+CY组肿瘤组织内新生毛细血管都有不同程度的损害,而GXZYT+CY组的破坏最为严重,毛细血管管壁较薄且不连续,血管破裂并可见部分残存的血管碎片。5.免疫组化显示,GXZYT组、CY组、GXZYT+CY组VEGF阳性表达和MVD值均低于模型组,GXZYT+CY组降低最明显。6.MVD的计数结果与VEGF结果呈正相关。结论:1.膈下逐瘀汤联合环磷酰胺能提高Hca-f肝癌小鼠生存质量;2.膈下逐瘀汤联合环磷酰胺能提高Hca-f肝癌小鼠的免疫功能;3.膈下逐瘀汤联合环磷酰胺可能具有抑制Hca-f肝癌小鼠肿瘤血管生成作用;4.膈下逐瘀汤联合环磷酰胺可降低Hca-f肝癌小鼠瘤组织中VEGF蛋白表达;5.膈下逐瘀汤联合环磷酰胺可降低Hca-f肝癌小鼠瘤组织中MVD;6.膈下逐瘀汤联合环磷酰胺提高Hca-f肝癌小鼠生存质量、提高免疫功能、抑制肿瘤血管生成的作用可能是通过降低VEGF蛋白表达和减少肿瘤间质中微血管密度而实现的;7.膈下逐瘀汤联合环磷酰胺可能通过抑制Hca-f肝癌小鼠肿瘤血管生成作用、降低VEGF蛋白表达、减少肿瘤间质中微血管密度而抑制肿瘤的转移。
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