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目的：构建可溶性TNF受体(P55) 和IgGFc融合蛋白的高效原核表达载体，实现在原核细胞中的高效表达。在体外对TNFR：IgGFc融合蛋白的免疫学活性和拮抗TNF毒副作用的生物学活性进行初步研究，以期为体内研究提供基本条件。方法：以人心肌cDNA文库为模板，PCR扩增TNF受体(P55) 胞外区全基因(tumornecrosis factor receptor extra-cellular domains，TNFR-ED)，亚克隆入pGEM-T／IgGFc中构建pGEM-T／TNFR-ED：IgGFc重组子，然后以其为模板，在上游引物中引入原核细胞高频密码子，再次PCR扩增去信号肽TNF受体(P55) 胞外区和IgGFc融合蛋白基因(TNFR：IgGFc)，亚克隆入pUC19载体，经序列测定正确后克隆入原核表达载体pRsetA中。将获得的原核表达质粒pRsetA／TNFR：IgGFc转入大肠杆菌BL21(DE3) ，经IPTG诱导表达，对表达产物进行免疫学，生物学活性鉴定和初步纯化。结果：TNFR：IgGFc融合蛋白获得了高效表达并以包涵体的形式存在，SDS-PAGE密度扫描显示融合蛋白约占菌体蛋白的25％。免疫蛋白印迹证实为我们所构建的融合蛋白，ELISA实验表明复性后的融合蛋白可与TNF很好的结合，体外抗TNF细胞毒性活性检测，证明该蛋白可拮抗TNF的毒性作用，经FPLCMonoQ阴离子交换柱初步纯化后融合蛋白可达70％。结论：本研究结果表明我们已成功获得具有良好免疫学活性和生物学活性的经原核细胞表达的TNFR：IgGFc融合蛋白，并建立了对该蛋白进行纯化的初步方法，为体内进一步研究应用TNFR：IgGFc融合蛋白进行抗TNF治疗奠定了基础。