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目的了解兰州地区2011-2012年儿童急性下呼吸道感染相关14种病毒病原学及流行病学特征,为临床诊治和疾病预防控制提供参考。方法1.采集2011年12月-2012年11月兰州大学第一医院儿科急性下呼吸道感染住院患儿的鼻咽抽吸物(nasopharyngeal aspirates, NPA)标本共387份,将收集的NPA加入2m1病毒保存液并置于-80℃冰箱保存。所有标本于患儿入院当日或入院3日内采集并取得家属知情同意。2.采用荧光定量PCR (Real-time PCR)方法检测样本中呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial viruses, RSV),鼻病毒(rhinovirus, HRV),腺病毒(adenovirus, ADV),副流感病毒(parainfluenza virus, PIV)1-4型(PIV1、PIV2、 PIV3、PIV4),人偏肺病毒(human metapneumonia virus, HMPV),人博卡病毒(human bocavirus, HBoV),流感病毒(influenza virus, IFV) A、B型(IFVA.IFVB),人肠道病毒(human enterovirus, HEV),冠状病毒(human coronavirus, HCoV) HKU1和NL63(HCoV-HKU1、HCoV-NL63)。3.将其中腺病毒阳性标本进一步采用巢式PCR,鼻病毒和肠道病毒阳性标本采用逆转录PCR(RT-PCR)方法扩增,产物进行测序分型。结果1.387份标本中,366份标本至少检出一种病毒,总检出率为94.57%,各病毒检出率由高到低依次为RSV52.97%, HRV24.55%, ADV16.80%, PIV314.47%, HMPV12.14%, HBoV10.08%, NL638.27%, IFVA4.65%, IFVB4.65%, PIV43.36%, PIV12.84%, HEV2.58%, PIV21.55%, HKU10.26%。2.本研究中3岁以内患儿总体病毒检测阳性率明显高于3岁以上患儿,RSV在6月以内患儿检出率最高,HMPV在3岁~5岁患儿检出率最高,IFVA在3岁~5岁患儿检出率最高,IFVB在6月-1岁患儿检出率最高,PIV3在3岁以内患儿检出率明显高于3岁以上患儿,其余7种病毒检出率无明显年龄分布特征。3.病毒总体检出率在性别和季节上无明显差异。14种病毒中,ADV、IFVA、 IFVB在春季检出率较高,NL63在夏季检出率较高,HRV、PIV3在秋季检出率较高iRSV、PIV1在冬季检出率较高,HEV在秋冬季检出率高于春夏季,HMPV、 HBoV、PIV、PIV2、HKU1各季节检出率差异无统计学意义。4.本研究中,毛细支气管炎患病率在男性和女性患儿分别为44.27%(116/262)和35.20%(44/125),毛细支气管炎患病率在男女患儿间差异无统计学意义。在年龄方面,毛细支气管炎患儿平均年龄小于非毛细支气管炎下呼吸道感染患儿,两者差异有统计学意义。本研究中支气管炎患儿病毒病原以HRV、ADV及PIV3为主,肺炎病毒病原以RSV、HRV、ADV为主,毛细支气管炎病毒病原以RSV、HRV、ADV为主。5.本研究病毒混合感染率为50.55%(185/366),混合感染率最高的三种病毒为NL63、HBoV、ADV, RSV、HBOV、HEV三种病毒混合感染的病毒载量低于单一感染的病毒载量。毛细支气管炎组患儿病毒检测阳性率高于支气管炎和肺炎组患儿,且RSV和HBoV在毛细支气管炎组患儿有较高的病毒载量。6.95例HRV中有45例可分出型别,兰州地区HRV主要以A型(28例)为主,其次为C型(16例)和B型(1例)。C型患儿平均病毒载量高于A型,A型与C型感染患儿平均年龄差异无统计学意义。65例ADV中有44例可分出型别,分型结果显示,ADV-B组中,3型7例,7型9例,14型4例;ADV-C组中,1型4例,2型12例,5型3例;ADV-F组中,41型3例,40型2例。本研究中未检出A组、D组、E组及G组ADV。结论1.病毒是兰州地区儿童下呼吸道感染的重要病原,其中RSV、HRV、ADV居于前三位,冠状病毒NL63在本年度检出率明显升高,需进一步对其进行连续监测和关注。2.毛细支气管炎患儿具有较高的病毒阳性率,表明毛细支气管炎的发生与病毒感染相关。3.RSV和HBoV在毛细支气管炎患儿组病毒载量较高,提示这两种病毒高载量可能与喘息相关。