论文部分内容阅读
研究背景:甲状腺滤泡癌是较常见的甲状腺分化癌之一,甲状腺滤泡型肿瘤良恶性的鉴别也是病理诊断中的难点。随着分子技术的发展,陆续发现了许多分子标记物(molecular biomarkers)可能有助于鉴别甲状腺滤泡型肿瘤的良恶性。但目前没有一类分子具有足够的敏感性和特异性能独立作为诊断之用的分子标记物。在新型分子标记物中,DNA损伤诱导转录物3(DNA damage inducible transcript3, DDIT3)、染色体1开放读码框24(chromosome1open reading frame24, Clorf24)、高迁移率族蛋白A2(highmobility group A2, HMGA2).肠三叶因子(intestinal trefoil factor, TFF3)等分子可能对鉴别甲状腺良恶性结节有较高的敏感性和特异性。因此本实验通过RT-PCR方法在核酸水平上检测甲状腺肿瘤组织中DDIT3、Clorf24、HMGA2、TFF3基因的表达,评估所选标记物是否可用于甲状腺结节良恶性的鉴别。方法:挑选南京军区南京总医院2011年1月至2011年10月的手术切除的甲状腺结节组织标本,总计29例,其中滤泡状腺瘤12例,滤泡状癌8例,包括1例乳头状癌滤泡型变,乳头状癌8例。另取正常甲状腺组织6例作为对照。病理分型由石蜡包埋切片组织学诊断确定。新鲜组织切取后立即放于-80。C冰箱冻存。冻存组织经处理后提取RNA,反转录为cDNA,然后进行RT-PCR在核酸水平上分别检测甲状腺组织中四种目的基因HMGA2、TFF3、Clorf24、DDIT3及内参基因Beta-actin的表达水平。以2-ΔCT表示目的基因的相对表达量。数值以均数±标准差(X±s)表示,对各组的2-ΔCT分别进行两独立样本的t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。采用SPSS16.0软件进行统计分析。结果:①对RT-PCR结果进行分析,Clorf24mRNA的表达相对于正常组织,在滤泡状腺瘤中的表达下调(P<0.05);与正常组织和滤泡状腺瘤相比,C1orf24mRNA在甲状腺滤泡状癌中的表达上调,其中在甲状腺滤泡状癌和滤泡状腺瘤中表达间的差异有统计学意义(P<0.05)。②与在正常组织中的表达相比,DDIT3mRNA在滤泡状腺瘤中的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05);相对于正常组织和滤泡状腺瘤,在滤泡状癌中的表达上调,并且在滤泡状癌和滤泡状腺瘤中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。③HMGA2mRNA在甲状腺滤泡状癌中呈现高表达,与滤泡状腺瘤相比差异有统计学意义(p<0.05),在正常组织和滤泡状腺瘤中该分子的表达也存在差异(p<0.05)。④TFF3mRNA的表达水平在滤泡状癌和滤泡状腺瘤中均下调,但在滤泡状癌中的表达高于滤泡状腺瘤(p<0.05)。结论:通过RT-PCR检测甲状腺肿瘤组织中HMGA2、TFF3、Clorf24、DDIT3等基因的表达,结果显示该4种基因在甲状腺滤泡状癌和滤泡状腺瘤的中的表达均有差异。检测该4种因子的表达对甲状腺滤泡状癌和滤泡状腺瘤的鉴别有一定意义。