【摘 要】
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二噁英类化合物(Dioxin-like compounds)是典型的持久性有机污染物,它们对生物体具有强致癌、内分泌干扰、肝毒性、免疫毒性、皮肤毒性、生育障碍等健康威胁,因此对它们的监
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二噁英类化合物(Dioxin-like compounds)是典型的持久性有机污染物,它们对生物体具有强致癌、内分泌干扰、肝毒性、免疫毒性、皮肤毒性、生育障碍等健康威胁,因此对它们的监控就显得极为重要。目前对二噁英类化合物的分析方法多种多样,但总的来说可以把它们归结为仪器分析法和生物分析法。其中仪器分析法样品前处理过程繁琐,检测周期长,检测成本昂贵,同时对检测人员的技术要求也比较高,限制了该方法在环境监测中的应用。由于二噁英类化合物具有相似的毒性机理,均能通过AhR信号通路影响cyp1a1基因的表达,因此我们设计并构建cyp1a1启动子调控GFP基因的方式,获得稳转的HepG2细胞系与转基因斑马鱼,尝试用体外和体内生物分析法对二噁英类化合物进行检测分析,初步获得如下结论:1)在体外培养的细胞中,经改造的含有多个二噁英反应元件(Dioxin response elements,DRE)的cyp1a1启动子的确可以增加TCDD诱导的报告基因的表达。2)以GFP作为报告基因构建的细胞系由于其背景荧光强度较高,只有在远高于环境浓度的TCDD暴露下才显示出荧光强度的差异,因此该细胞系并不适合环境中二噁英类化合物污染的检测。3)利用TALEN技术成功获得了经改造的cyp1a1启动子调控GFP基因的转基因斑马鱼。应用该转基因斑马鱼对TCDD进行初步检测的结果显示:该转基因斑马鱼在TCDD暴露下,其荧光强度表现出较好的剂量效应和时间效应,而且检测的灵敏度较高,为今后进一步筛选用于水体环境中二噁英类化合物污染水平监测的转基因鱼提供了重要基础。
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