【摘 要】
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目的:通过血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）大鼠行为学、海马CA1区神经细胞病理形态、细胞凋亡及凋亡相关基因p38MAPK、Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达的变化,观察p38MAPK信号通路对VD大鼠海马区细胞凋亡及其学习记忆能力的影响,进一步探讨电针治疗VD的作用机制,为针灸临床治疗VD提供实验基础。方法:SD雄性大鼠进行Morris水迷宫实验,筛选出学习
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目的:通过血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）大鼠行为学、海马CA1区神经细胞病理形态、细胞凋亡及凋亡相关基因p38MAPK、Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达的变化,观察p38MAPK信号通路对VD大鼠海马区细胞凋亡及其学习记忆能力的影响,进一步探讨电针治疗VD的作用机制,为针灸临床治疗VD提供实验基础。方法:SD雄性大鼠进行Morris水迷宫实验,筛选出学习记忆能力正常的大鼠。随机分为假手术组和待造模组。待造模组大鼠采用双侧颈总动脉（Common Carotid Arteries,CCA）反复缺血再灌注的方法复制VD模型。按随机数字表法将造模成功且存活的大鼠分为模型组、电针组。电针组采用0.30mm×25mm毫针刺入“百会”“大椎”“膈俞”“足三里”,给予2Hz刺激,1次/d,连续15d。于造模后第1d和第17d进行神经症状评分和卒中指数评分,第17d对各组大鼠学习记忆能力进行Morris水迷宫检测。HE染色观察海马CA1区神经细胞病理形态学变化,原位末端转移酶标记法（TUNEL）检测海马CA1区神经细胞凋亡,RT-PCR法检测海马组织中凋亡相关基因p38MAPK、Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达。结果:1电针对大鼠行为学的影响1.1神经症状评分和卒中指数评分造模后第1d,与假手术组相比,电针组和模型组神经症状评分和卒中指数评分均升高（P＜0.01）;造模后第17d,与模型组相比,电针组神经症状评分和卒中指数评分明显降低（P＜0.01）。1.2 Morris水迷宫实验结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长、穿越原平台次数明显减少（P＜0.01）;与模型组相比,电针组大鼠逃避潜伏期明显缩短、穿越原平台次数明显增加（P＜0.01）。2电针对大鼠海马CA1区神经细胞病理形态学的影响HE染色结果显示:假手术组大鼠海马CA1区神经细胞形态规则完整,排列整齐,无明显病理形态学改变;模型组大鼠海马CA1区神经细胞排列紊乱,数量减少,细胞核皱缩、变小;电针组较模型组神经细胞排列较整齐,数量增多,无明显细胞核皱缩、变小。3电针对大鼠海马CA1区神经细胞凋亡的影响TUNEL检测结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区阳性细胞增多,AI值明显升高（P＜0.01）;与模型组相比,电针组大鼠海马CA1区阳性细胞减少,AI值明显降低（P＜0.01）。4电针对大鼠海马组织凋亡相关基因mRNA表达的影响RT-PCR检测结果显示:与假手术组相比,模型组p38MAPK mRNA表达显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,电针组p38MAPK mRNA表达显著降低（P＜0.01）。与假手术组相比,模型组Bcl-2 mRNA表达显著降低（P＜0.01）;与模型组相比,电针组Bcl-2 mRNA表达显著升高（P＜0.01）。与假手术组相比,模型组Bax mRNA表达显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,电针组Bax mRNA表达显著降低（P＜0.01）。与假手术组相比,模型组Caspase-3 mRNA表达显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,电针组Caspase-3 mRNA表达显著降低（P＜0.01）。结论:电针通过调控p38MAPK信号通路相关基因p38MAPK、Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA的表达,抑制了VD模型大鼠海马神经细胞的过度凋亡,减轻了反复缺血再灌注对神经细胞的损伤,改善了VD模型大鼠的学习记忆能力。
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