众所周知,单一指标的含量测定很难反映中药的整体质量,而指纹图谱具有系统性、特征性和重现性的特点,能较全面的反映中药的品质,现己成为控制中药质量的有效途径之一。龙胆近些年成为了药材开发重点,国内外一些专家对龙胆的药理活性作了深入的研究,但是对于滇龙胆的研究涉及较少。因此,本文致力于建立滇龙胆和炮制滇龙胆的指纹图谱的共有模式,为滇龙胆药品质量的评价和滇龙胆的标准化种植提供依据。实验以龙胆苦苷、当药苷为指标成分,采用HPLC法构建不同产地滇龙胆药材及炮制滇龙胆药材的指纹特征谱。本实验重点研究内容是建立滇龙胆以及炮制滇龙胆的指纹图谱及其共有模式。指纹图谱必须具有代表性,这就要求滇龙胆的样品具有代表性,因此在滇龙胆药品的采集上,本着不同产地、不同采摘时间、不同气候条件的原则采集样品。采用比较稳定的HPLC法制定指纹图谱,同时对不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量进行测定和比较。指纹图谱相似度只能定性反映不同批次样品间各成分在种类及其相对含量上的相似程度,但不能反映不同批次样品间成分绝对含量的差异,因此采用整体相似度和总峰面积比来共同衡量药材的质量。对不同产地滇龙胆的有效成分龙胆苦苷的含量进行测定,将龙胆苦苷的含量和指纹图谱结合起来共同评价药材的质量。首先,滇龙胆的最佳提取工艺为：95%甲醇密封超声提取2次,每次30min；后者最佳的炮制条件为：加入相当于原料量10%的黄酒,拌润至黄酒被吸尽后,在150℃～200℃下炒10min,取出晾凉,即得。其次,根据《中药色谱指纹图谱》的指导,考察了指纹图谱的色谱条件。在柱子的选择上,根据柱分离度好且峰型尖锐,选用Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6x150mm,5gm)；流动相分析甲醇-水和乙腈-水两种溶剂系统,实验得出乙腈-水溶剂系统梯度洗脱能使各主要色谱峰达到较好的分离,且基线较平稳；在柱温的选择上,温度过高对柱子的损坏较大,因此采用30℃作为实验的柱温。综上所述,实验的色谱条件为：乙腈-水溶剂系统梯度洗脱,Agilent ZORBAX SB-C18柱,柱温为30℃。根据查阅的药材提取及炮制工艺,制得滇龙胆及炮制滇龙胆的样品溶液,并在上述色谱条件下制备l0批不同产地滇龙胆及炮制滇龙胆的液相色谱图,使用由国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”相似度评价软件,以S1为参照图谱,经过多点校正,自动匹配,以中位数法,生成对照图谱R,由匹配数据的输出结果得到共有峰共13个。经过与标准品的紫外图谱及保留时间比较,确认,5号峰为龙胆苦苷,6号峰为当药苷,其中龙胆苦苷的峰面积百分比超过40%,因此选作参照峰,建立了滇龙胆及炮制滇龙胆的HPLC指纹图谱共有模式。