CD133/PCNA和Nestin/PCNA双染共表达在胶质瘤研究中的应用及其临床意义

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目的:在脑肿瘤中,胶质瘤的发病率约40.49%,胶质瘤呈浸润性指状生长,与周围正常脑组织界限不明显,多数发生于数个脑叶,手术难以完全切除。脑胶质瘤恶性程度高,各部位病理特征不同,其恶性度也不相同,胶质瘤细胞对放射线不敏感,化疗药物难以透过血脑屏障,术后放化疗效果不满意,目前治疗手段效果均不满意,而术后复发率高,患者的中位生存期平均为14.6个月。随着研究的进一步深入,发现胶质瘤的复发和脑肿瘤干细胞密切相关,并提出脑肿瘤干细胞假说。脑肿瘤干细胞理论认为是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体,它们具有自我更新能力和多向分化潜能及增殖能力,是形成不同分化程度肿瘤细胞和促进肿瘤不断生长的根源。而肿瘤术后对放化疗的抵抗和术后复发是当今脑肿瘤治疗方面存在的主要难题,针对脑肿瘤干细胞的特异性研究及如何针对性治疗,增加疗效,减少复发成为热点。目前认为,C D 1 3 3、Nestin是特异性的BTSC标志物,针对特异性标志物的准确而快速的检测并开发出靶向治疗的药物和方法,是亟待解决的问题。而PCNA作为肿瘤细胞增殖状态的指标,已广泛应用于增殖程度评价。本研究希望通过CD133与PCNA和Nestin与PCNA在不同级别胶质瘤中的共表达来研究胶质瘤干细胞的增殖数,探索胶质瘤干细胞对肿瘤组织增殖的影响,并为以后胶质瘤的治疗提供一定的有意义的探索。方法:按照WHO 2003的神经系统肿瘤分类分级标准的95例人脑胶质瘤标本,先应用免疫组化法检测分别检测CD133和Nestin,证实存在CD133表达的62例胶质瘤标本纳入本研究进行CD133/PCNA共表达研究,Nestin表达的70例脑胶质瘤标本纳入本研究进行Nestin/PCNA共表达研究。免疫组织化学双染色方法检测CD133与PCNA及Nestin与PCNA在不同级别脑胶质瘤中共表达情况,计算CD133与PCNA及Nestin与PCNA阳性细胞所含比例,再进行和肿瘤病理分级分别进行相关性分析,并对它们之间的关系进行分析。统计学分析:应用SPSS13.0统计软件进行数据分析,计数资料采用χ~2检验,以p<0.05。结果:按照WHO 2003的神经系统肿瘤分类分级标准,经筛选后表达CD133的标本为:低级别(Ⅰ,Ⅱ级)标本21例,高级别(Ⅲ,Ⅳ级)标本41例,合计62例,表达Nestin的标本:低级别(Ⅰ,Ⅱ级)标本为23例,高级别(Ⅲ,Ⅳ级)标本47例。在脑胶质瘤中CD133/PCNA共表达组中,低级别组(Ⅰ,Ⅱ级)例数为21例, C/P为9例,高级别组(Ⅲ,Ⅳ级)例数为41例,C/P为30例,阳性率分别为42.86 %和73.17%,χ~2=5.469 ,P值为0.019,差异有统计学意义。Nestin与PCNA共表达组中,低级别组(I,Ⅱ级)为23例,N/P为11例,高级别组(Ⅲ,Ⅳ级)例数为47例,N/P为38例,共表达阳性率分别为47.62%和80.85%,χ~2=8.020,P值为0.005,差异有统计学意义。以上结果显示在不同的病理级别组中表达有明显差异。结论: CD133/PCNA和Nestin/PCNA在脑胶质瘤中的表达情况随着肿瘤恶性程度的增高而增强,病理级别越高,表达越强,且显著高于对照组。在胶质瘤组织中CD133阳性细胞亚群比Nestin阳性细胞亚群更具相对特异性。CD133/PCNA、Nestin/PCNA双染共表达的联合检测研究有利于更准确地判断胶质瘤生物行为和评估患者预后,针对肿瘤干细胞进行特异性精确性的靶向治疗提供实验依据。
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