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目的:狼疮性肾炎是系统性红斑狼疮的主要并发症之一,发病率逐年升高但治愈率很低,因此探明其发病机制并寻求有效治疗靶点尤为迫切。LN的病理改变多种多样,硬化性肾小球肾炎是多数LN患者的终末阶段,因此探讨肾小球硬化原因是缓解其发生发展的重要切入点。本研究拟以本研究拟以LN患者肾穿标本及人系膜细胞系为研究对象,His-HMGB1和LN置换血浆为刺激物,通过研究HMGB1对系膜细胞FN的分泌的作用及机制,探讨HMGB1是否通过与肾小球系膜细胞表面RAGE受体结合诱导系膜细胞细胞外基质沉积从而参与LN的发生。方法:1探讨HMGB1与LN肾小球系膜细胞FN分泌之间的关系。以HMC为研究对象,LN置换血浆为刺激物,通过HMGB1特异性抑制剂甘草酸抑制LN置换血浆中HMGB1的活性,通过ELISA技术检测HMC培养上清中FN蛋白的表达。2探讨RAGE与CollagenⅣ在LN肾穿标本肾组织的表达。以LN肾穿标本为研究对象,癌旁远端正常组织为对照组,通过免疫组化技术检测肾组织RAGE与CollagenⅣ的表达水平并分析二者的相关性。3探讨肾小球系膜细胞RAGE蛋白表达水平。以HMC为研究对象,His-HMGB1为刺激物,western blot技术HMC表面RAGE的表达水平,IP技术检测HMGB1和RAGE的结合水平。4探讨HMGB1/RAGE与LN肾小球系膜细胞FN分泌之间的关系。以HMC为研究对象,His-HMGB1为刺激物,通过RAGE抑制剂Box A干预HMGB1与RAGE的结合,通过ELISA技术检测HMC培养上清中FN蛋白的表达。结果:1 HMGB1介导了LN置换血浆所引起HMC的FN分泌上调ELISA结果显示,与对照组相比,LN置换血浆刺激组HMC的培养上清中FN表达升高;与LN置换血浆刺激组相比,甘草酸+LN置换血浆组HMC的培养上清中FN表达下调。2 LN患者肾小球细胞RAGE和CollagenⅣ蛋白表达上调免疫组化结果显示,癌旁远端正常肾组织RAGE蛋白无明显表达,LN患者肾穿标本RAGE蛋白和CollagenⅣ蛋白表达明显升高;统计分析结果显示RAGE和CollagenⅣ蛋白呈明显正相关。3 HMGB1上调HMC RAGE表达水平且与其结合水平增加Western blot结果显示,与对照组相比,His-HMGB1刺激组HMC的RAGE蛋白表达水平明显升高;IP结果显示,His-HMGB1刺激组HMC中可检测到与His结合的RAGE蛋白。4抑制RAGE与HMGB1结合后HMGB1诱导的HMC FN分泌降低,ELISA结果显示,与His-HMGB1刺激组相比,Abox+His-HMGB1刺激组HMC培养上清中FN蛋白表达下降。结论:HMGB1可能通过与RAGE结合诱导系膜细胞细胞外基质沉积参与LN的发生。