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干旱制约着我国的农业发展,植物表皮蜡质含量增加能够提高其抗旱性。增加植物表皮蜡质的分泌进而改良荒漠区作物的抗逆性,是提升干旱区农业生产力的有效途径之一。表皮特异性启动子是一种重要的组织特异性启动子,能够驱动蜡质合成相关基因在植物表皮特异表达,从而增加植物表皮蜡质含量,但表皮特异性启动子的相关研究较少。本实验以拟南芥和蒺藜首蓿基因组DNA为模板,分别扩增获得了AtML1、AtCER6及MtML1基因5’端起始密码子的上游启动子序列;通过农杆菌介导的烟草瞬时侵染法和拟南芥浸花法对AtML1、AtCER6和MtML1启动子的功能特性进行了初步分析,得到如下结论:1.通过PCR技术克隆得到拟南芥AtML1、AtCER6及蒺藜苜蓿MtML1基因5’端起始密码子上游序列2162 bp、1209 bp和2150 bp;经PlantCARE在线软件分析表明,这3段序列中均含有启动子典型特征的保守序列以及多种光响应元件,并且拟南芥AtML1基因5’端起始密码子上游序列中存在与表皮特异性相关的特殊元件,初步推测这3段序列分别为拟南芥AtML1、AtCER6和蒺藜苜蓿MtML1基因启动子。2.通过Gateway重组技术,以GUS为报告基因,构建了 3个启动子的植物表达载体,并命名为AtML1::GUS、AtCER6::GUS及MtML1::GUS。3.以烟草叶片为受体,利用农杆菌介导转化法对3个启动子进行瞬时表达研究,并对叶片进行GUS组织化学染色,结果表明拟南芥AtML1、AtCER6以及蒺藜苜蓿MtML1启动子均具有启动子功能,且在非诱导条件下,3个启动子均具有启动下游GUS报告基因表达的能力。4.将AtCER6::GUS及MtML1::GUS表达载体通过农杆菌介导的花粉通道法在拟南芥中进行遗传转化,通过BASTA抗性筛选,共获得AtCER6启动子阳性转化植株4株,获得MtML1启动子阳性植株6株。对转基因拟南芥的各个部位进行GUS染色,结果表明:拟南芥AtCER6启动子和蒺藜苜蓿MtML1启动子属于表皮特异性启动子,能驱动下游GUS报告基因在植物表皮发挥活性。本研究克隆得到了拟南芥AtML1、AtCER 及蒺藜苜蓿MtML1基因启动子,初步验证了其在烟草叶片的活性并进一步分析了其在拟南芥中的表皮特异性功能特性,为通过调控表皮蜡质沉积改良荒漠区牧草和作物抗逆性奠定了坚实的基础。