小麦-小伞山羊草1U衍生系的创制与鉴定

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小伞山羊草(Aegilopsumbellulata)是U基因组二倍体物种,也是含U基因组多倍体山羊草的U基因组供体。小伞山羊草含有多种优良基因,可用于小麦遗传改良,其1U染色体含有分子量较大的高分子量谷蛋白基因,导入普通小麦可能改良加工品质。小麦异染色体系是转移和利用近缘属、种优良基因的重要中间材料。为了转移、利用小伞山羊草1U染色体优异的高分子量谷蛋白基因,从课题组前期利用四倍体小麦-小伞山羊草双二倍体与普通小麦杂交获得的小麦-小伞山羊草衍生系群体中鉴定出8份小麦-小伞山羊草1U染色体衍生系。本研究综合利用分子细胞学、SNP芯片、反相高效液相色谱(RP-HPLC)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、农艺性状考察、SDS微量沉降值测定等,鉴定并分析了它们的染色体组成及数目、高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)组成、种子贮藏蛋白含量等。获得的主要结果如下:1.使用两组FISH探针Oligo-pSc119.2/Oligo-pTa535和Oligo-pTa71/(AAC)5从复合杂交组合STU8/CSph1b//绵麦37(MM37)///蜀麦126(SM126)和STU1/国豪15(GH15)//西科麦11号(XK11)筛选到8份含1U染色体的衍生系。其中,来源于STU8/CSph1b//MM37///SM126的衍生系有:1U/1B二体代换系(18B5-28,2n=42)、1U、1B双单体系(18B5-45,2n=42)、1U/1B二体代换且保留1BL单端体(18B1-11,2n=43)、1U/1B单体代换且保留1BL单端体(18B5-1,2n=42)、1U二体附加系(18B5-16,2n=44)和1U单体附加系(18B2-1,2n=43)。来源于STU1/GH15//XK11的衍生系有:1U/1D单体代换系(18S2-18,2n=41)和1U、1D双单体系(18S2-26,2n=42)。对18B5-28的自交后代19B5-28的GISH鉴定显示其含一对1U染色体,55KSNP芯片分析表明,不同染色体的标记缺失数3-1394个,缺失率0.44%-78.23%,除6D和1B的标记缺失率大于7%外,其余的均在7%以下,1B的标记缺失率高达78.23%,由此表明1B很有可能被1U替换。2.对小麦-小伞山羊草衍生系18B1-11及18S2-18及其六倍体亲本进行了株高、穗长、芒长、小穗数、分蘖数及结实率等农艺性状考察。结果表明,18B1-11的株高和分蘖数低于CSph1b而高于另外亲本的,穗长和芒长大于所有亲本的,小穗数与所有亲本的接近,结实率低于所有亲本的;18S2-18分蘖数多于两个亲本的。对8份衍生系后代及其亲本进行了50粒重、粒长、粒宽及长/宽比等籽粒性状考察。结果表明,19B5-1的50粒重(1.75±0.05g)在所有衍生系中最大,与六倍体小麦亲本SM126的接近;19S2-18的粒长(7.90±0.58mm)最长,极显著大于六倍体小麦亲本GH15和XK11的;19B5-45(2.96±0.37mm)的粒宽最宽,与六倍体小麦亲本MM37的接近;19B5-16籽粒长/宽比(2.32±0.23)最小,与六倍体小麦亲本MM37的接近。3.对8份小麦-小伞山羊草衍生系进行了SDS-PAGE和RP-HPLC分析。SDS-PAGE结果表明,B5-28(1U/1B二体代换系)及B5-16(1U二体附加系)的HMW-GS组成在两个世代间完全相同,没有分离,而其余6份衍生系后代的HMW-GS组成有分离。RP-HPLC分析表明小伞山羊草二倍体、四倍体小麦-小伞山羊草双二倍体及衍生系在某些洗脱时间有相似的谷蛋白和醇溶蛋白吸收峰,表明衍生系中的这些蛋白可能来自1U。来源于STU8/CSph1b//MM37///SM126的6个小麦-小伞山羊草衍生系的HMW-GS含量均高于三个六倍体小麦亲本的,而HMW-GS、LMW-GS及醇溶蛋白含量均低于二倍体小伞山羊草PI226500亲本的;来源于STU1/GH15//XK11的2个小麦-小伞山羊草衍生系的HMW-GS含量介于两个六倍体小麦亲本之间,LMW-GS含量和醇溶蛋白含量则低于和高于两个六倍体小麦亲本的,两个小麦-小伞山羊草衍生系的HMW-GS、LMW-GS及醇溶蛋白含量均低于二倍体小伞山羊草CIae29的,醇溶蛋白含量低于四倍体小麦PI349045的。4.对小麦-小伞山羊草衍生系19B5-45、19B1-11、19B5-1、19B5-16、19B2-1和19S2-26进行SDS-微量沉降值测定,结果显示它们的微量沉降值均极显著高于亲本的,初步表明导入1U染色体可增加沉降值。
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