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茶树[Camellia sinensis(L.)O.Kuntze]是一种多年生木本植物,在我国南方广泛种植。其叶片加工而成的茶饮品,因其含有丰富的茶多酚、咖啡碱、脂多糖等,具有防癌、抗癌的作用,因此,受到全世界人民的喜爱。然而,在茶树生长发育过程中,会遭受各种生物(如病原菌、真菌等)和非生物(如干旱、高温等)因素的胁迫,严重影响茶叶的产量和品质,造成严重的经济损失。陕西气候干燥,土壤盐碱化较为严重,因此,为研究茶树在逆境条件下的调控机制,以及抗逆基因的功能分析,培育抗逆性较强的茶树新品种,本文以茶树品种“陕茶1号”为试验材料,以叶片cDNA为模板,从中克隆出茶树WRKY57和WRKY40两个基因,并对这两个基因编码的氨基酸序列进行生物信息学分析,在聚乙二醇6000(PEG 6000)、氯化钠(NaCl)、脱落酸(ABA)处理下,基因表达模式分析以及转录激活活性验证。主要研究结果如下:1.克隆了两个与茶树盐胁迫、干旱胁迫、ABA信号调控途径相关的WRKY转录因子基因CsWRKY57和CsWRKY40。生物信息学分析表明,CsWRKY57开放阅读框(ORF)为912 bp,编码303个氨基酸,预测分子量为33.5 kD,理论等电点为5.49,蛋白比对显示,CsWRKY57含有一个WRKY核心序列和一个Cx4Cx23HxH型锌指结构,属于WRKYIIc家族;Cs WRKY40开放阅读框(ORF)为963bp,编码320个氨基酸,预测分子量为35.06 kD,理论等电点为8.80,氨基酸序列比对显示,CsWRKY40含有一个约60个氨基酸的WRKY保守结构域,锌指结构为Cx5Cx23HxH型,属于WRKYIIa家族。2.利用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)分析CsWRKY57和CsWRKY40基因在100μM ABA、20%PEG6000、300 mM Na Cl胁迫处理下的表达模式,发现在这些胁迫处理下,CsWRKY57和CsWRKY40均被诱导表达,并且表达量在短时间内迅速增加,之后逐渐下降,并且不同基因在不同胁迫处理下,表达模式存在差异。3.将CsWRKY57和CsWRKY40基因分别与酵母表达载体pGBKT7连接,以空载体pGBKT7作为阴性对照,pCL1载体作为阳性对照,分别观察目的蛋白CsWRKY57和CsWRKY40的转录激活活性。结果表明:CsWRKY57和CsWRKY40蛋白均无转录激活活性。