近期研究表明,膳食营养素通过影响肠道微生态系统导致人类产生疾病。亚油酸作为一种多不饱和脂肪酸,是人体生理活动中必不可少的营养素。但其含量过高会对人体肠道菌群造成伤害,尤其是具有益生功能的乳酸杆菌。目前有关饮食中多不饱和脂肪酸影响乳酸杆菌活性的原因尚不清楚。在本研究中,使用亚油酸来研究其抑制乳酸杆菌活性的作用机制。筛选出受亚油酸影响最大的乳酸杆菌菌株,确定亚油酸影响其生长活性的最低抑制浓度,通过体外和体内试验进行综合分析。使用流式细胞术和荧光显微镜观察乳酸杆菌细胞膜的损伤程度,并通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜进一步观察细胞结构。在亚油酸的影响下测定了乳酸杆菌连续10小时的生长趋势和其菌悬液中的关键代谢产物的含量。体外试验模拟胃肠道环境,统计亚油酸干预下乳酸杆菌活菌数。在体外模拟胃肠道的基础上进行体内试验,验证亚油酸在体内是否也会抑制乳酸杆菌的生长活性。体内试验通过RT-PCR法检测小鼠粪便中乳酸杆菌基因含量,然后用荧光标记后的乳酸杆菌对小鼠进行灌胃,24小时后通过荧光显微镜观察小鼠各部分肠段中乳酸杆菌的存活情况。结果表明,在八种不同种属的乳酸杆菌中,受亚油酸影响最大的菌株是鼠李糖乳杆菌。在亚油酸浓度为50μg/m L时,鼠李糖乳杆菌菌体细胞膜受损,细胞结构发生变化;连续10小时内,鼠李糖乳杆菌生长缓慢,细胞内关键代谢产物泄漏;鼠李糖乳杆菌在体外模拟肠液中活性急剧下降。在动物试验中,饲喂亚油酸组的小鼠粪便中鼠李糖乳杆菌基因含量比较低。同时,荧光显微镜下也观察到各个肠段荧光标记的鼠李糖乳杆菌数量较少,尤其是回肠和结肠部位。体外和体内研究表明,亚油酸会抑制乳酸杆菌的生长活性,其作用机制是亚油酸破坏了乳酸杆菌的细胞膜,从而影响了细菌的正常代谢,最终导致其死亡。本研究有助于阐明亚油酸抑制乳酸杆菌生长活性的作用机制,了解膳食营养素与益生菌之间的相互关系,从而开发科学有效的功能性食品。