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类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一种以关节肿胀,疼痛和僵硬为主要临床表现的自身免疫性疾病。壮药八味龙钻颗粒是在龙钻通痹方的基础上自主研发的民族药复方制剂,临床上主要用来治疗RA。目前八味龙钻颗粒化学成分研究较少及缺乏抗RA整体药效学评价及作用机制研究。本课题采用UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定其化学成分,HPLC-DAD法测定主要有效成分含量;并采用1H-NMR的代谢组学方法探讨八味龙钻颗粒治疗RA的作用机制,为其质量控制及临床开发利用提供依据。目的:1.鉴定八味龙钻颗粒的化学成分,测定其4种有效成分含量,促进其质量控制;2.评价八味龙钻颗粒治疗RA模型大鼠的药效作用及分子代谢作用机制。方法:1.应用UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定八味龙钻颗粒的化学成分,采用HPLC-DAD法测定其4种有效成分的含量;2.采用牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂建立胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型,八味龙钻颗粒药液（1.25,2.5,5 g/kg）灌胃干预30天,然后通过评价各组大鼠体重、足趾容积、关节炎指数、免疫器官指数、膝关节组织病理指标,探讨八味龙钻颗粒对CIA大鼠的治疗作用。另外,采用ELISA法检测血清中促炎细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-6、IL-1β和抗炎细胞因子IL-4、IL-10的含量,探讨八味龙钻颗粒对CIA大鼠的抗炎作用。3.采用1H-NMR的代谢组学结合多元统计分析方法对正常对照组、CIA模型对照组和八味龙钻颗粒高剂量组（BLG-H）大鼠血清进行系统性分析,确定与RA相关的潜在差异代谢物及该药物在代谢水平对RA的调控作用。通过代谢通路网络分析,揭示八味龙钻颗粒治疗RA的分子代谢作用机制。结果:1.从八味龙钻颗粒中共鉴定出20个化学成分,包括衡州乌药碱、木兰花碱、青藤碱、木兰箭毒碱、四氢巴马汀等成分。八味龙钻颗粒中青藤碱、木兰花碱、橙皮苷及毛两面针素的平均含量依次为6.054、4.866、2.436、2.102 mg·g-1。2.与正常对照组比较,CIA模型对照组大鼠足趾容积从第10天（P<0.05）起明显升高;胸腺指数（P<0.05）和脾脏指数（P<0.001）均明显上升;膝关节表现炎性细胞浸润,滑膜增生;血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ的水平明显升高（P<0.01）,而IL-4的水平显著下降（P<0.01）。与CIA模型对照组比较,八味龙钻颗粒中、高剂量（2.5,5 g/kg）组分别从第25天（P<0.05）、20天（P<0.05）起显著抑制CIA大鼠足趾肿胀;中、高剂量组还可显著降低胸腺指数（P<0.01）,明显减轻CIA大鼠炎性细胞浸润,滑膜增生,显著降低CIA大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量（P<0.05）,同时能明显升高IL-4、IL-10的含量（P<0.05）。3.代谢组学PLS-DA得分图显示,正常对照组、CIA模型对照组和BLG-H组的代谢轮廓区分显著,提示八味龙钻颗粒干预了大鼠体内某些内源性代谢物。CIA模型对照组较正常对照组大鼠血清中共筛选出18个差异内源性代谢物,八味龙钻颗粒干预后,回调了其中16个异常代谢物,其中下调了10个代谢物:低密度脂蛋白/极低密度脂蛋白、3-羟基丁酸、脂质、氮乙酰基糖蛋白、氧乙酰基糖蛋白、乙酰乙酸、磷酸胆碱、氧化三甲胺、甜菜碱、甲酸;上调了6个代谢物:乳酸、肌酸、葡萄糖、丙氨酸、谷氨酰胺、赖氨酸。代谢通路影响值大于0.1的潜在靶标代谢通路有4条,分别为酮体的合成和代谢、丙氨酸/天冬氨酸/谷氨酸代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、丁酸代谢。结论:1.八味龙钻颗粒主要含有生物碱类成分,少数为黄酮类、木脂素类等成分。建立的HPLC-DAD法简便、准确,重现性好,可用于八味龙钻颗粒中4种有效成分的含量测定,并为其质量控制提供参考。2.八味龙钻颗粒中、高剂量组（2.5,5 g/kg）有效地改善了CIA大鼠关节炎的严重程度,其中高剂量组效果最佳。八味龙钻颗粒可以通过下调促炎细胞因子（IL-1β、TNF-α、IL-6）和上调抗炎细胞因子（IL-4、IL-10）来抑制炎症反应。3.八味龙钻颗粒治疗RA的作用机制可能与改善脂质代谢、糖酵解、氨基酸代谢、酮体代谢、炎症反应和肠道菌群代谢有关。