广东海水网箱养殖鱼类细菌和寄生虫病原的分离、鉴定及流行病学调查

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近年来我国水产养殖业发展迅速,海水网箱养殖作为水产养殖中的重要模式及我国出口贸易水产品最主要的来源之一而倍受重视。然而,随着该养殖产业的快速发展和无序的扩张,养殖密度过高,海区负荷过大,管理技术落后,养殖设施陈旧,海水养殖环境迅速恶化等诸多问题的出现,导致养殖品种的病害日益严重,大规模流行性病害频繁爆发,给海水养殖业造成了巨大的经济损失。为了查清南海水域养殖鱼类的病原种类,准确鉴定和监测常见病原菌和寄生虫,及时掌握网箱鱼类病害发生的规律,为海水鱼类疾病的预防和治疗提供可靠的科学数据。作者于2007年1月至2007年12月的一整年间,对广东粤东粤西地区的主要网箱养殖鱼类进行定期的病害检测和调查。选取惠东县盐州镇和茂明市茂港区作为调查地点,每月定时进行样品采集,调查了10个科21种鱼类共计216尾海水经济鱼类,其结果如下:1.海水鱼类链球菌的分离鉴定:采用常规的细菌分离,细菌的生理生化特性测定,ITS序列的分析,鉴定出4株海豚链球菌(Streptococcus iniae)。以ITS设计的特异性诊断引物,借助PCR技术,可以高度特异和敏感地鉴定海豚链球菌,灵敏性可达11.25pg的微量DNA模板级别;通过分离株ITS测序分析,不同菌株间的序列具有高的相似性(98%)。2.海水鱼类美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的分离鉴定:在常规的细菌分离、理化特征鉴定的基础上,借助以ITS序列而自行设计的特异性引物,灵敏度达到43.75pg的微量DNA,从而获得高度特异敏感的分子生物学鉴定方法。通过PCR扩增,可以高度特异和敏感的检测到2株美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida);而通过对分离株的ITS测序比对,不同菌株间的序列具有较高的相似性(99%)。3.海水鱼类寄生单殖吸虫的分类鉴定:采用传统形态学方法,对作为单殖吸虫主要分类依据的后吸器和交接器,进行显微观察与测量。结果发现:在133尾海水经济鱼类中采集到包括4个科8个属的单殖吸虫,分别为分室科的本尼登虫属,锚首虫科的海盘虫属、四叉虫属,鳞盘虫科的片盘虫属、拟合片盘虫属和远交虫属,微杯虫科的微杯虫属和似多唇虫属。其中对玫氏新本尼登虫(Neobendenia melleni),真黑鲷海盘虫(Haliotrema eukurodai),螺管海盘虫(Haliotrema spirotubiforum),宽顶海盘虫(Haliotrema ampliocuspidis),裸颊鲷海盘虫(Haliotrema fleti),日本片盘虫(Lamellodiscus japonicus),石斑拟合片盘虫(Pseudorhabdosynochusepinephel),拉氏远交虫(Telegamatrix ramalingami),微杯虫(Microcotyle sp.),似多唇虫(Polylabroides sp.),四叉虫(Tetrancistrum sp.)的分类特征进行详细描述。4.广东海水网箱养殖鱼类致病菌的感染率及季节变动分析:本试验调查的主要致病菌平均感染率为2.78%,其中海豚链球菌的感染率为1.85%,对大黄鱼的最高感染率为5.56%;美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的感染率为0.93%,对篮子鱼的感染率最高为10%。美人鱼发光杆菌杀鱼亚种主要在冬春季发病,而海豚链球菌则主要在夏季发病。5.广东海水网箱养殖鱼类寄生单殖吸虫的季节变动、感染率、感染强度以及与宿主相关性的分析:单殖吸虫感染率最高月份在11月,为100%;感染率最低在7月,为36%,全年平均感染率为61.6%。单殖吸虫种群在春冬季节的感染率明显高于夏秋季节,其感染强度在夏秋季节要高于春季。本调查显示:本尼登虫属、海盘虫属、片盘虫属对样本鱼的感染率分别为20.4%,19%,7.9%;大多数种类单殖吸虫不是单一寄生,而是两种或两种以上共存。黄鳍鲷上寄生的单殖吸虫有8种,而且有61.9%的宿主寄生种类超过一种。
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