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类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种以滑膜异常增生,骨和软骨进行性破坏为特征的慢性、系统性和破坏性的自身免疫性疾病,常引起关节骨质损坏和功能障碍。目前缺乏真正有效而毒副作用小的治疗药物,因此,对RA的发病机理予以系统而合理的解释,并在中医药领域寻找高效低毒控制RA病情的新药是当前研究的重要方向。豹皮樟总黄酮（ total flavonoids of L itsea coreana Leve.,TFLC）是从我国药食同源植物豹皮樟提取的有效部位,具有高效、低毒的作用特征,本课题组前期已经证实了TFLC对佐剂性关节炎大鼠有明显的抗炎和免疫调节作用,但其作用机制仍尚不明确,值得进一步深入研究。尽管RA的发病机制目前仍不完全清楚,但已有研究显示其中自身抗体,抗原抗体复合物,炎症介质,炎性细胞因子的产生起到了重要的作用。有研究报道许多炎性细胞因子（TNF-α,IL-1,iNOS,COX-2等）的表达受到核因子κB（NF-κB）的调节,据此我们推测TFLC也是通过调节NF-κB信号传导通路而产生抗炎作用。因此,本课题在成功提取纯化CII、建立大鼠胶原性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）模型的基础上,以CIA大鼠腹腔巨噬细胞（PMΦ）为靶细胞,研究体外TFLC对PMΦ炎性细胞因子表达的影响作用,并重点观察TFLC对LPS刺激的CIA大鼠PMΦ上NF-κB活化的影响作用,从而进一步阐明TFLC对类风湿关节炎防治作用的分子机制,为将其开发为治疗类风湿关节炎提供实验依据。主要研究包括以下三个方面:1.建立大鼠胶原性关节炎模型采用自提CII建立大鼠胶原性关节炎（Collagen-induced arthritis,CIA）模型,从体重、足爪肿胀度、多发性关节炎评分、病理等几个方面评价,评价TFLC对CIA大鼠的治疗作用。结果显示:TFLC(50、100、200 mg·kg-1)能抑制关节肿胀,增加CIA大鼠体重,改善膝关节病理损伤。2.体外TFLC对CIA大鼠PMΦ免疫功能及产生炎性介质和炎性细胞因子的影响无菌取PMΦ,采用TFLC与CIA大鼠PMΦ体外共培养,研究TFLC对CIA大鼠PMΦ免疫功能及产生炎性介质和炎性细胞因子的影响。结果表明:TFLC（0.05、0.5、5μg·ml-1）可降低CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,下调脾细胞IL-2的分泌水平和腹腔巨噬细胞IL-1的分泌水平,同时抑制PMΦTNF-α,NO的分泌水平。且反转录RT-PCR结果表明,TFLC可抑制LPS刺激的CIA大鼠PMΦ炎性细胞因子TNF-α,IL-1,iNOS和COX-2 mRNA的表达,并促进抑炎性细胞因子IL-10 mRNA的表达。提示其降低CIA大鼠PMΦ过强的吞噬功能,抑制炎性细胞因子的分泌和表达可能是其对类风湿关节炎的治疗和防治作用机制之一。3. TFLC对LPS刺激的CIA大鼠PMΦ中NF-κB的活化以及对胞质核因子抑制蛋白α（IκBα）表达的影响蛋白质印迹法检测细胞核内NF-κB/p65蛋白及胞质中核因子抑制蛋白IκBα的表达量。结果表明:LPS组中胞核NF-κB/p65蛋白表达水平明显高于其余四组,胞质IκBα蛋白表达水平明显低于其余组。TFLC（0.05、0.5、5μg·ml-1）可以抑制NF-κB的活性和IκBα的降解。推出TFLC通过抑制NF-κB的转录水平来抑制LPS诱导的炎性细胞因子表达,表明TFLC可通过NF-κB信号传导通路调控炎症的发生发展,进一步明确了TFLC对关节炎的防治作用的分子机制,为RA的免疫治疗提供了重要的基础理论依据。