研究背景与目的肺癌是癌症死亡的首位原因,其分类以肺腺癌为主,目前尚无针对可手术切除肺癌的相对无创的早期诊断及动态监测的血液生物标志物。循环游离DNA(circulating cell-free,cfDNA),由于其无创,便捷及可重复性,同时能反映肿瘤异质性及实时变化的优势,可能成为一个补充筛查及早期诊断肺癌的方法。CfDNA浓度及其表观遗传变异(如DNA甲基化)可能提供有用的监测治疗疗效或诊断信息。CfDNA包含来自肿瘤细胞释放入血的循环肿瘤DNA(circulating tumor,ctDNA),但大多数cfDNA不是癌起源的,因此检测含有大量非肿瘤源性的cfDNA中癌症相关的等位基因一直难以实现。长散在核元素-1(Long interspersed nuclear elements-l,LINE-1)是占据人类基因组中大约17%比例的DNA重复序列,这一特点使得其利于被检出。已有研究证实肺癌组织中LINE-1低甲基化,健康人中高甲基化,然而尚未见肺癌在cfDNA中LINE-1的甲基化研究。本论文目的是研究健康人对比可切除的肺腺癌患者手术前后血浆cfDNA浓度及LINE-1甲基化水平的差异,探索肺腺癌患者的血浆cfDNA浓度及LINE-1甲基化水平在临床的潜在应用价值,如肺癌的早期诊断,治疗疗效。实验方法利用超高灵敏度QuantusTM荧光计测量血浆cfDNA浓度。用Taqman探针标记的实时荧光定量PCR(qPCR)的方法检测血浆cfDNA中LINE-1甲基化水平,共50个血样本,包括20例肺腺癌患者术前及术后的血样本及10例健康对照者的血样本。通过相对定量的方法来分析血浆cfDNA中LINE-1甲基化水平。采用SPSS 13.0统计软件,Wilcoxon秩和检验、Kruskal-Wallis Test H检验和Mann-Whitney Test U检验的统计方法分析肺腺癌患者手术前后对比健康人的血浆cfDNA浓度及LINE-1甲基化水平有无差异,并分析它们在各临床病理指标分组中有无差异。实验结果肺腺癌患者血浆cfDNA浓度及LINE-1甲基化水平在手术前后存在显著差异。血浆cfDNA浓度肺腺癌患者cfDNA浓度显著高于健康对照组,术后较术前升高。肺腺癌患者血浆cfDNA中LINE-1甲基化基线水平(术前)低于正常对照组,手术后较手术前升高。血浆cfDNA浓度在各临床病理指标分组中均无显著差异。而血浆cfDNA中LINE-1甲基化水平在不同性别及身体质量指数(Body Mass Index,BMI)分组中有显著差异,其中LINE-1甲基化水平男性低于女性,在其他临床病理指标分组中则未见显著差异。结论本研究探讨cfDNA浓度用于肺癌的早期筛查的可能性,发现cfDNA浓度与肿瘤切除无关。进一步检测血浆中特异性LINE-1甲基化水平与肺腺癌手术切除呈负相关,实验结果提示cfDNA中LINE-1甲基化改变是潜在的临床血液生物标志物。