论文部分内容阅读
益生菌在促进人体健康和防止疾病发生中发挥着重要的作用。本论文从大量分离获得的乳酸菌菌株中,筛选具有优良特性的益生菌,并对其进行鉴定,为研究和开发具有自主知识产权的益生菌产品奠定基础。本论文从三个方面开展研究:即乳酸菌功能特性研究,以筛选获得性能良好的益生菌;对筛选获得的益生菌进行鉴定;益生菌加工特性研究。对分离的乳酸菌进行耐酸和耐胆汁酸盐试验,供试的15个菌株都能在pH3、0.3%胆汁酸盐中存活;供试菌株中有10个能在pH2、0.3%胆汁酸盐中存活5h,其中Q菌的生长情况最好,其耐受能力最强;在pH3、0.2%胆汁酸盐下只有Q菌能继续生长。对分离的乳酸菌进行了抑制致病性大肠杆菌和幽门螺旋杆菌的试验,通过研究供试菌株对大肠杆菌均有抑制作用,抑制作用最强的为Q菌,抑菌圈直径12.6mm,超过对照菌株BB-12的8mm。供试菌株大部分对幽门螺旋杆菌有抑制作用,抑制作用最强的为B菌,抑菌圈直径13mm,其次为Q菌12.7mm,对照菌株BB-12为9.8mm。对分离的乳酸菌进行了体外粘附能力试验,通过研究,供试菌株中对Caco-2细胞粘附能力最高的为A菌,其粘附平均值为18.7±5.92个/细胞,其次为Q菌12.9±2.74个/细胞,对照菌株BB-12为10.7±2.46个/细胞。先用乳酸菌粘附2h后,Q菌和E菌对大肠杆菌竞争粘附抑制力最强;先用大肠杆菌粘附2h,再用乳酸菌粘附,粘附数与空白大肠杆菌粘附数相差不大。对分离的乳酸菌进行了抗氧化试验,通过研究Q菌受试品喂服小鼠8天使得SOD活力增强,MDA含量有所降低,具有一定的抗氧化能力。在功能特性研究的基础上,对筛选获得的Q菌,进行初步鉴定。经传统的形态学观察及代谢产物气相色谱测定分析,Q菌归属于乳杆菌属(Lactobacillus)。通过API 50CHL试验条生理生化特性研究,鉴定Q菌99.9%为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏号为CGMCC No.1531,中国专利申请号为:200510111588.9,菌株名为鼠李糖乳杆菌LV108。在此基础上,进一步利用分子生物学方法对鼠李糖乳杆菌LV108进行了16S rRNA基因的扩增与测序,BLAST在线比对结果是:与菌株Lactobacillus rhamnosus MCRF-412和Lactobacillus rhamnosus MCRF-271 16S rRNA的基因序列只相差一个碱基,同源性高达99.9%。与全球最著名的益生菌Lactobacillus rhamnosus GG ATCC 53103的16S rRNA只相