间质成纤维细胞对口腔癌细胞系Tca-8113生物学行为影响的实验研究

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第一部分 不同口腔组织来源的成纤维细胞的生物学特性比较 目的初步探讨不同口腔组织来源的成纤维细胞生物学特性的差异,为深入研究口腔CAFs的生物学行为奠定基础。 方法用组织块培养法获得原代口腔CAFs和NMFs,0.25%胰蛋白酶消化传代和纯化细胞;免疫细胞化学SP法对CAFs和NMFs的间质细胞源性进行鉴定;观察CAFs和NMFs的形态、超微结构、生长动态;绘制CAFs和NMFs的生长曲线和有丝分裂指数曲线;观察CAFs和NMFs的无血清条件培养液对口腔癌细胞Tca-8113增殖的影响;采用半定量RT-PCR检测CAFs和NMFs中4种与肿瘤生存发展相关的基因表达。 结果成功分离获得了第3代纯化口腔CAFs和NMFs,细胞免疫化学结果显示CAFs表达Vimentin和α-SMA,NMFs只表达Vimentin,二者均不表达Cytokeratin。与NMFs相比,CAFs呈长梭形多突起,胞浆内有丰富的粗面内质网、线粒体和成束排列于胞膜下的肌丝,核圆形或椭圆形一侧有切迹,杂乱排列,生长速度较快(P<0.05),分裂能力较强(P<0.05);CAFs的无血清条件培养液的促
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