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背景:卵巢癌属于妇科的恶性肿瘤之一,卵巢癌在妇科的各类肿瘤中的发病率是在第三位,在子宫颈癌和子宫体癌之下,然而卵巢癌的致死率最高。由于卵巢癌早期诊断困难且转移和复发率高,所以卵巢癌的五年生存率在几十年来一直低于40%。目前卵巢癌的临床治疗方案主要是肿瘤切除手术,术后采用放射疗法、化学疗法和生物疗法等辅助治疗,其中化学治疗是效果很显著的治疗方法。然而,75%的卵巢癌病人被诊断为卵巢癌时已经发展到了晚期阶段,而晚期卵巢癌病人的生存概率十分低,因此,我们需要研究新型的卵巢癌治疗方案,寻找新的肿瘤治疗靶点来攻克卵巢癌。BTG2基因(B-cell translocation gene 2)是BTG/TOB抗增殖基因家族中的成员之一。研究表明,BTG2基因可能与肿瘤细胞的增殖、转移以及调控细胞周期进程相关。因此,BTG2基因可能是卵巢肿瘤治疗的一个靶向基因。目的:本课题是通过研究BTG2基因对卵巢癌细胞的生长增殖、转移、细胞周期和顺铂的敏感性的影响及与之相关的分子机制,为卵巢癌患者从基因水平上提供新的治疗靶点。方法:1.通过生物信息学方法分析TCGA数据库中正常的卵巢组织和卵巢肿瘤组织中BTG2的m RNA表达、不同肿瘤分期的患者BTG2基因m RNA的表达水平和BTG2基因表达相对高或低的5年生存曲线。2.采用实时定量RT-q PCR方法来检测细胞或组织中BTG2基因的m RNA水平的表达水平。3.通过lipofectamin2000脂质体包裹BTG2过表达质粒和sh RNA质粒进行细胞的转染,转染后用G418抗生素筛选得到稳定表达的单克隆细胞株。4.采用MTT实验和克隆形成实验检测A2780细胞和SKOV3细胞的生长增殖能力。5.采用流式细胞术的方法检测细胞的周期分布情况。6.采用Transwell小室的实验检测细胞的迁移能力。7.通过蛋白印迹法检测细胞中BTG2基因蛋白的表达情况。结果:1.生物信息学分析结果表明卵巢肿瘤组织的BTG2基因的m RNA表达水平较正常的卵巢组织低;G2和G3期的卵巢癌病人的BTG2基因的m RNA水平要明显低于G1期的患者;BTG2基因表达水平高的卵巢癌患者组5年的生存率高于BTG2基因表达水平较低的卵巢癌患者组。2.临床组织样本的RT-q PCR结果表明卵巢肿瘤组织的BTG2基因的m RNA含量较正常的卵巢组织更低。3.MTT实验和克隆形成实验说明BTG2基因高表达可以抑制卵巢肿瘤细胞的生长和增殖。4.流式细胞实验的数据表明BTG2基因高表达可以使卵巢肿瘤细胞产生G1期阻滞。5.Transwell小室的实验数据表明BTG2基因高表达可以抑制卵巢肿瘤细胞的转移能力。6.蛋白印迹法结果证明BTG2基因通过调控细胞周期相关的蛋白Cyclin D1和CDK4的表达水平来影响卵巢肿瘤细胞周期的变化,而BTG2调控卵巢癌细胞的转移能力是通过抑制转移相关蛋白MMP-2和MMP-9蛋白的表达来完成的。7.q PCR和Western Blot结果说明了卵巢肿瘤细胞中BTG2的表达含量随着顺铂浓度增高而的明显上升,顺铂诱发的卵巢肿瘤细胞增殖抑制可能是通过BTG2基因调节。结论:BTG2基因能够抑制卵巢肿瘤细胞的增殖、转移,阻滞卵巢肿瘤细胞周期,增强卵巢肿瘤细胞对顺铂的敏感性,这表明BTG2基因可以作为卵巢癌的基因治疗靶点。