【摘 要】
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该研究将其选为候选基因,在猪中开展研究.通过克隆、定位猪IRS-1基因,并搜寻其中蕴藏的单核苷酸多态位点,为进一步研究猪肌肉生长发育的分子机理打下基础,同时也为以猪作为二
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该研究将其选为候选基因,在猪中开展研究.通过克隆、定位猪IRS-1基因,并搜寻其中蕴藏的单核苷酸多态位点,为进一步研究猪肌肉生长发育的分子机理打下基础,同时也为以猪作为二型糖尿病分子机理研究的动物模型做了铺垫.主要研究结果如下:⒈采用同源比较克隆的策略,比较人与小鼠胰岛素受体底物I基因的序列,以RT-PCR技术为手段,分8段逐段扩增IRS-1基因以构建重叠群,通过序列拼接获取了长3756bp,覆盖95﹪基因编码区的猪IRS-1基因序列.⒉运用辐射杂种板技术对猪IRS-1基因进行染色体区域精细定位.两点分析结果显示,猪IRS-1基因与微卫星标记SW315紧密连锁(LOD值为7.65),据此将猪IRS-1基因定位于SSC15q25.⒊参照人IRS-1基因的研究结果,从猪IRS-1基因序列中选取两个包含重要SNP位点的片段进行SNP扫描,搜索潜在的SNP位点.应用单链构象多态性与测序相结合的方法在杜洛克猪群体(42头)与藏猪群体(28头)中筛选到两个SNP位点:一个位于2650,发生G到A的转换;一个位于3257,发生C到A的颠换.比较人IRS-1基因的阅读框发现,这两个SNP均可引起编码的氨基酸改变,可能具有重要生物学意义.
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