管花肉苁蓉提取物及其化学对照品的制备及质量研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huawei_2009
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管花肉苁蓉Cistanche tubulosa(Schrenk)R.Wight为列当科中种子繁殖的多年生寄生草本植物,常寄生于柽柳属(Tamarix)植物的根部,在我国主要分布于新疆、内蒙古等具有大陆性气候的温暖荒漠地域。该植物是历史悠久的民间常用药材,现代药理学研究表明,它具有抗氧化与抗自由基、免疫调节、促进记忆力、神经保护、抗衰老、抗肿瘤等药理活性。其中的苯乙醇苷和多糖等化学成分在抗帕金森病、抗老年性痴呆、抗衰老和免疫调节等方面的研究更加受到重视。  20世纪90年代开始,随着人们不断对管花肉苁蓉的深入研究与开发利用,其野生植物资源受到了严重的威胁,已经成为我国珍稀濒危野生保护植物。近年来,国内学者对其进行了系统的保护生物学研究,在新疆区域内建立了规范化的管花肉苁蓉寄主柽柳的种植资源基地。目前,由于在新疆南部区域的人工栽培规模的扩展,资源有不断增加的趋势,为我国市场上中药肉苁蓉的主流基源植物。但是,随着中药现代化发展中规范化步伐的加快、标准化要求的不断提高和物质基础的完善,管花肉苁蓉药材资源的质量稳定性和可控性、利用效率和产业的持续发展等药材资源保护、开发和可持续利用面临着更大的压力,这些问题的关键在于缺乏管花肉苁蓉种质资源的质量评价(或控制)标准及其指标成分、中间产品(如标准提取物)制备工艺的技术标准与可比性,从而导致药材资源的供应与产业现代化、市场需求的矛盾日益突出。因此,本论文致力于继承传统中药材—管花肉苁蓉,以药理活性为出发点,综合运用多种制备色谱分离技术,对管花肉苁蓉及其粗提取物进行化学成分研究,分得12个化合物,用波谱学分析手段,确定了化合物结构,如:松果菊苷(1)、毛蕊花糖苷(2)、异麦角甾苷(3)、2-乙酰基初麦角甾苷(4)、管花苷A(5)、cistanoside C1/C2(6)等含量均为95.0%以上。采用Melannoma mouse皮肤瘤细胞株KML筛选体外抗癌活性,结果表明echinacoside、 acteoside、 isoacteoside、cistanoside C1/C2等化合物对增殖有拮抗作用。在此基础上,采用HPLC法,对管花肉苁蓉药材进行指纹图谱研究,10批药材的相似度均在0.923以上,又建立了简便、快速和准确的含量测定方法。基于中药提取动力学理论与方法,采用有机溶剂提取法,对新疆产管花肉苁蓉中苯乙醇苷化合物进行提取工艺研究,确定了最佳的提取工艺条件,即:固液比为1∶16,乙醇浓度为50%,提取温度为60℃。接着又采用多种大孔吸附树脂,详细考察静态、动态吸附和解吸动力学过程,建立了富集管花肉苁蓉中苯乙醇苷的分离纯化制备工艺条件,即:每1 gAB-8大孔树脂对松果菊苷和毛蕊花糖苷的最佳吸附量分别为79.8 mg和8.6 mg;吸附体积流速为2 BV·h-1,以50%的乙醇溶液为解吸剂,洗脱体积流速2 BV·h-1。同时,依照前述分离纯化工艺条件重复操作,结果得到管花肉苁蓉提取,其按干燥品计算,每1g管花肉苁蓉提取物含松果菊苷和毛蕊花糖苷的总量50.7%以上。以管花肉苁蓉药材与其提取物作为原料资源,通过半制备HPLC和HSCCC与柱色谱相结合,分离,纯化制备了5种苯乙醇苷化学标准物质,含量均在97.3%以上,为新疆特色植物资源的深入开发提供科学依据。
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