【摘 要】
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以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SY1和深红酵母(Rhodotorula rubra)RrY001二倍体为出发菌株,通过单倍体分离,液体抗性水平检测,获得酿酒酵母单倍体抗性菌株SY1-1(Cu抗
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以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SY1和深红酵母(Rhodotorula rubra)RrY001二倍体为出发菌株,通过单倍体分离,液体抗性水平检测,获得酿酒酵母单倍体抗性菌株SY1-1(Cu<2+>抗性水平为3mmol/L)和深红酵母单倍体抗性菌株RrY001-8(Cd<2+>抗性水平为1mmol/L).按常规蜗牛酶酶解两单倍体抗性菌株,原生质体形成优化条件为:(1)酿酒酵母:0.8mol/LNaCl,1.5％蜗牛酶,酶解60min,0.3％β-巯基乙醇,(2)深红酵母:0.8mol/LNaCl,2.0％蜗牛酶,酶解60min,0.3％β-巯基乙醇.对获得的原生质体进行紫外线诱变,最佳照射时间为2min和3min.通过液体抗性水平检测获得了两个单倍体抗性诱变菌株SY1-1-4(Cu<2+>抗性7mmol/L)和RrY001-8-14(Cd<2+>抗性3mmol/L),它们拮抗重金属能力比原始出发菌株分别提高了1.3倍和2倍.在非重金属选择压力下,50世代的遗传稳定性检测表明,诱变菌株遗传稳定性均保持在90％以上.生物学功能研究结果表明,诱变菌株拮抗紫外线(UV)、拮抗<60>Co辐射能力均明显高于出发菌株;酿酒酵母诱变菌株SY1-1-4清除羟基自由基能力是出发菌株的1.7倍.以3％海藻酸钠为载体进行细胞包埋固定化,AAS法检测固定化细胞吸附污水中重金属离子的能力.结果表明诱变菌株的重金属吸附能力较出发菌株有较大提高,诱变菌株对Cu、Cd、Zn、Pb四种重金属离子的去除率均明显高于出发菌株,其中酿酒酵母诱变菌株SY1-1-4对Cu、Cd、Zn、Pb四种重金属离子的去除率分别是出发菌株的1.9、2.2、1.5、2.5倍;深红酵母诱变菌株RrY001-8-14的去除率分别是出发菌株的1.7、2.2、1.4、2.7倍,固定化诱变酵母细胞处理污水显示出较好的工业应用前景.
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