在前期研究中,利用差减杂交技术对孤雌与正常胚胎发育相关联的基因的分析,我们发现了差异表达的基因Ypel3。该基因位于小鼠7号染色体qF3区域内,包含5个外显子,mRNA全长为1 057 bp。基因上游存在一个具有56个CpG位点的CpG岛,该CpG岛覆盖启动子、第一外显子和部分第一内含子。本课题对Ypel3基因的印记状况、该基因的时空特异性表达与胚胎发育的关系以及表观遗传学调控机制进行了分析,为该基因后续的功能分析奠定基础。通过基于SNP标记的直接测序法分析Ypel3基因的印记状况,结果表明该基因在E18.5天小鼠脑组织为双等位表达。进一步选取E11.5、E13.5和E15.5天的胚胎,采用原位杂交技术对Ypel3基因的时间特异性表达进行分析,结果表明Ypel3在E11.5天胚胎主要表达在脑和神经管;在E13.5天胚胎,Ypel3在前脑、中脑、后脑以及舌、肝、肾脏均有表达;在E15.5天胚胎,Ypel3脑中的表达主要分布在侧脑室、中脑室、小脑的内皮层、丘脑和垂体,此外在脊髓、鼻突、舌、肺、肝、肾等组织中广泛表达。应用定量RT-PCR技术对Ypel3在E15.5天胚胎各组织的空间特异性表达进行分析,发现该基因广泛表达在脑、舌、心、肺、肝脏和肾脏等组织中,其中脑的表达量最高。脑和肾脏的定量RT-PCR结果显示,在脑发育过程中Ypel3基因从E12.5天到E15.5天逐渐增高,在E15.5天表达量达到峰值,之后逐渐降低,而在肾脏中,该基因的表达从E12.5天到E18.5天持续增高。通过定量RT-PCR技术分析Ypel3基因在E10.5-E18.5天胚胎的表达情况,结果表明该基因的表达量随胚胎发育逐渐增高。此外,甲基转移酶抑制剂5-杂氮胞苷(5-Aza)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)分别或联合处理小鼠神经瘤细胞系(Neuro-2a, N2a)的定量RT-PCR结果显示在5-Aza处理的N2a细胞中Ypel3基因的表达未发生改变,而4-PBA处理的N2a细胞中Ypel3基因的表达量增高,二者联合处理后Ypel3基因的表达量进一步增高。这些结果说明Ypel3基因可能是与胚胎多器官发育相关联的重要基因,并且该基因的表达在小鼠神经瘤细胞系中可能受到组蛋白乙酰化的调控。