脱敏组方抗Ⅰ型和Ⅳ型变态反应的实验研究

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目的 观察中药脱敏组方对Ⅰ型和Ⅳ型变态反应的影响,探讨其抗变态反应的作用机制,为脱敏组方的临床应用提供理论依据。 方法 体外实验:1.脱敏组方对组胺兴奋离体回肠的影响。实验分五组:①脱敏组方对正常肠肌影响组:描计2min肠肌正常运动后,加入脱敏组方溶液,使平滑肌槽内药品的浓度达8mg/ml,稳定后,描计2min肠肌运动曲线。②组胺兴奋离体回肠组:描计正常肠肌运动后,加入组胺溶液,使槽内组胺浓度达0.01μg/ml,稳定后,描计2min运动曲线。③脱敏组方低剂量组④脱敏组方高剂量组⑤阳性对照药物扑尔敏组。后三组在描记组胺兴奋回肠运动曲线2min后,分别加入脱敏组方高、低剂量及扑尔敏,使各组药物浓度达4mg/ml、8mg/ml、0.01mg/ml,分别描计稳定后的运动曲线。根据加入不同药物后描计的回肠收缩幅度的大小,评价脱敏组方对组胺兴奋离体回肠的影响。2.脱敏组方稳定肥大细胞膜的作用。将纯化好的肥大细胞分为五组,分别加入阳性对照药物色苷酸钠(2%*0.1ml),脱敏组方高剂量(2.8g/ml*0.1ml),脱敏组方低剂量(1.4g/ml*0.1ml),模型和正常对照组不加药物,37℃孵育10min后,前四支试管中加入compound48/80对肥大细胞膜进行攻击,然后进行以下测定:①荧光分光光度计测定每组试管组胺释放量,评定各组药物对compound48/80引起的肥大细胞组胺释放的影响。②甲苯胺蓝染色,从形态学方面观察脱敏组方对肥大细胞脱颗粒的影响。⑧免疫组化法检测脱敏组方对compound48/80攻击后肥大细胞中5-HT表达的影响,对各组肥大细胞5—HT含量进行定量分析。通过以上三个方面观察脱敏组方稳定肥大细胞膜、抑制肥大细胞脱颗粒及释放炎症介质的作用。 体内试验:观察脱敏组方抗Ⅳ型变态反应的作用。1.脱敏组方对氯化钴(PC)诱导的小鼠接触性皮炎的影响。小鼠分为阳性药物(强地松)、脱敏组方高剂量
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