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背景卵巢癌是病死率最高的妇科恶性肿瘤。早期诊断困难、复发率高以及对化疗药物耐药等原因使卵巢癌患者预后极差。2018年发布的美国国家健康统计中心最新数据显示,上皮性卵巢癌五年总生存率为47%。因此,卵巢癌的发生发展相关分子机制的研究得到广泛关注。肿瘤的异质性是恶性肿瘤的特征之一,是指肿瘤在生长过程中,经过多次分裂增殖,其子细胞呈现出分子生物学或基因方面的改变,从而使肿瘤的生长速度、侵袭能力、对药物敏感性和预后等各方面产生差异,促使肿瘤细胞不断进化、发展,产生更强的适应能力,从而导致恶性肿瘤的转移、复发和耐药。因此,肿瘤异质性的分子机制研究已成为目前学者所关注的热点。外泌体(Exosome)是大小约为30-150nm的具有脂质双分子层膜结构的小囊泡,具有广泛的生物学活性,囊泡内能携带DNA、RNA及蛋白质等物质参与细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等多种生理和病理过程。外泌体的出现为肿瘤的深入研究提供了新的视角,肿瘤异质性的存在也使得外泌体参与肿瘤细胞恶性表型水平传递的研究逐渐受到学者的关注。卵巢癌被证实是一种高度异质性的肿瘤,但目前尚无侵袭转移表型传递的相关研究。那么,外泌体能否参与到高度异质性的卵巢癌细胞之间造成侵袭表型的水平传递是一个值得思考的科学问题。深入探索外泌体在卵巢癌侵袭表型形成中的机制,以期为研究卵巢癌侵袭和转移提供新思路,为卵巢癌的诊断和干预提供新策略。目的研究外泌体是否能够水平传递卵巢癌侵袭表型并探讨其作用机制材料与方法本研究采用H08910PM和HO8910这对同一来源但具有不同转移能力的人卵巢癌细胞株为实验对象,首先通过Transwell实验及CCK8实验探究HO8910PM及HO8910细胞在迁移、侵袭以及增殖方面是否存在差异。其次,通过透射电镜、粒径分析以及Western blot鉴定HO8910PM及HO8910细胞上清超速离心产物,并且通过共聚焦荧光显微镜观察荧光标记的外泌体是否能够被细胞摄取。接着,分别加入PBS、HO8910来源外泌体、HO8910PM来源外泌体与HO8910细胞共培养48h,通过Transwell实验比较三组间迁移侵袭能力的变化。为进一步探究HO8910PM来源外泌体改变HO8910细胞迁移侵袭能力的机制,利用RNA-Seq分析了 HO8910PM和HO8910细胞在转录组上的基因表达的差异,选择FN1基因进行深入研究。通过实时荧光定量PCR及ELISA验证基因FN1在两株细胞间是否存在差异表达。收集PBS、HO8910来源外泌体及HO8910PM来源外泌体与HO8910细胞共培养的细胞上清液以及细胞RNA,通过实时荧光定量PCR以及ELISA,比较FN1基因及其蛋白产物的变化。同时,小干扰RNA下调FN1基因表达,利用Transwell实验研究该基因对卵巢癌细胞侵袭迁移能力的影响。结果1.超速离心法能成功提取出HO8910PM及HO8910细胞培养上清中外泌体。2.HO8910PM细胞来源外泌体能够促进HO8910细胞侵袭迁移能力增加。3.FN1基因在HO8910PM细胞中较HO8910高表达,FN1基因产物Fibronectin在HO8910PM细胞上清液中表达明显高于HO8910。4.HO8910PM下调FN1表达后,细胞上清液中Fibronectin明显减少,细胞迁移侵袭能力下降。5.HO8910PM细胞来源外泌体能够通过上调HO8910细胞内FN1基因表达,促进Fibronectin蛋白表达增加,从而促使HO8910细胞迁移侵袭能力增加。结论1.超速离心法能成功提取出HO8910PM及HO8910细胞培养上清中外泌体。2.HO8910PM细胞来源外泌体能够通过上调HO8910细胞内FN1基因表达,促进Fibronectin蛋白表达增加,从而促使HO8910细胞迁移侵袭能力增加。