文冠果子仁的化学成分研究

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文冠果是无患子科文冠果属植物,一属一种,主产于北方地区,内蒙较多,是我国特有的药食两用植物。1984年版《中国民族药志》曾将其作为蒙药列入。国内外学者对文冠果化学成分的研究多集中于文冠果果壳、叶、根茎和花等,但子仁作为临床药物遗尿停的原料药,对其化学成分的研究主要集中在20多年前。随着技术手段的进步,该药用部位的化学成分尚有很大的研究空间。另外其药用部位作为种质资源,含有更多的支持生物繁育的生物活性物质,还有进一步深入化学成分研究的现实意义。因此本文采用各种分离纯化技术及波谱学方法对其化学成分进行分离鉴定,并采用高效液相色谱法对文冠果子仁进行含量测定及其方法学探讨性研究,以期为文冠果子仁的药效物质基础及质量控制研究提供科学参考。本论文将对二氧化碳超临界萃取处理后的文冠果子仁进行石油醚脱脂处理,再用70%乙醇浸渍提取,进一步回收浓缩浸渍液,至无醇味,得到合适体积与浓度的浓缩液,再依次用乙酸乙酯、水饱和正丁醇进行分级萃取,根据薄层检识对其乙酸乙酯和正丁醇部位化学成分进行分离。运用多种色谱方法(薄层色谱法、硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20色谱法)和制备液相对文冠果子仁70%乙醇提取物的化学成分进行分离纯化,根据理化鉴别及波谱法对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。本论文对文冠果子仁中分离纯化得到的12个单体化合物进行了理化鉴别和结构鉴定,包括4个三萜皂苷、2个黄酮、2个有机酸、2个甾醇、1个生物碱和1个多羟基醇,化学结构分别为3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-鼠李吡喃糖-(1→4)-(6-O-乙酰基)-β-D-葡萄吡喃糖-(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖苷(1)、bungankasaponin D(2)、bungankasaponin A(3)、bungankasaponin B(4)、腺嘌呤核苷(5)、5,7,4′-三羟基-3,6-二甲氧基黄酮(6)、5,3′-二羟基-3,6,4′-三甲氧基-黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(7)、tetraol(8)、9-十八碳烯酸(9)、特里杨苷(10)、β-谷甾醇(11)和胡萝卜苷(12)。采用HPLC色谱法在同一色谱条件下测定6批文冠果子仁部位中5,7,4′-三羟基-3,6-二甲氧基黄酮的含量,并建立文冠果子仁质量控制评价方法。色谱条件:安捷伦C18(250×4.6 mm,5μm)色谱柱、检测波长为254 nm、柱温为30℃、流动相为甲醇-0.1%磷酸水、梯度洗脱:0-25 min,30%-55%甲醇;25-25.1 min,55%-80%甲醇;25.1-50 min,80%-90%甲醇、进样量:10μL、流速为1.0 m L/min。6批文冠果子仁中5,7,4′-三羟基-3,6-二甲氧基黄酮的平均含量为7.254 mg/g,样品峰与相邻峰分离度大于1.5,达到了色谱分离的要求。质量浓度在4.274~25.64 ug/m L内与峰面积成良好线性关系。回归方程为Y=199.3x+17.34,r>0.999。本论文共分离得到12个单体化合物,化合物1、5~8和10均为为首次在文冠果属植物中分离得到,并采用高效液相法测定了6批文冠果子仁中5,7,4′-三羟基-3,6-二甲氧基黄酮的平均含量,所建方法简单,专属性良好,适用于文冠果子仁的含量测定研究。
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